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摘要：目的 观察舒心稳斑颗粒对兔血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平、兔动脉粥样硬化（AS）斑块中血管内皮生长因子（VEGF）表达及斑块形成的影响，探讨舒心稳斑颗粒抗AS作用机制。方法 将40只健康日本大耳白兔随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组和舒心稳斑颗粒组。空白对照组给予普通基础饲料喂饲，其余组给予高脂高胆固醇饲料喂养12周造成兔AS模型，灌胃给予相应药物4周，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清中MMP-9含量，采用免疫组化法分析主动脉粥样斑块中VEGF表达，同时观察主动脉及粥样硬化斑块病理学改变。结果 与模型组比较，舒心稳斑颗粒能明显降低血清中的MMP-9含量，差异有统计学意义（P<0.01）；明显降低VEGF在主动脉粥样斑块中的面密度，差异有统计学意义（P<0.01）。病理学结果显示，舒心稳斑颗粒干预后，主动脉粥样硬化斑块面积减少、斑块厚度变薄。结论 舒心稳斑颗粒通过抑制VEGF在AS斑块中的表达，降低血清中MMP-9的含量，抑制斑块内炎症反应，从而减少AS斑块形成。
关键词：舒心稳斑颗粒；动脉粥样硬化斑块；血管内皮生长因子；基质金属蛋白酶-9；兔
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）04-0055-04
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是心脑血管疾病的主要病理基础之一。研究表明，炎症反应在AS及其并发症的发生和发展过程中起到重要作用[1]。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）参与AS炎症反应，炎症反应能加速AS形成的进程[2]。血管内皮生长因子（VEGF）促进新生血管形成，高脂血症状态下，内源性VEGF参与血栓形成及内膜增生，促进AS发生发展[3]。本实验通过饲喂高脂饲料制造兔AS模型，观察舒心稳斑颗粒对兔AS斑块中VEGF表达、血清中MMP-9含量及斑块形成的影响，探讨其抗AS的可能作用机制。
1 实验材料
1.1 动物
健康3月龄日本大耳白兔40只，雌雄各半，体质量（2.0±0.2）kg，湖南中医药大学实验动物中心提供。合格证号：湖南省医学实验动物管理委员会医动字20-003号。实验动物环境设施合格证号：湘医动字20-001号。动物进入实验室后单笼喂养，实验前第3日皮下注射兔三联疫苗（齐鲁动物保健品厂，批号1009027），以预防兔瘟。兔用基础饲料由湖南中医大学动物实验中心按标准配方制备后提供。
1.2 药物
舒心稳斑颗粒由血竭、虎杖、瓜蒌壳、明矾等中药组成，采用超微颗粒（湖南春光九汇现代中药有限公司生产），湖南中医药大学附属第一医院药剂科提供，实验所用超微颗粒每克含原药材6 g，临用时用100 ℃开水溶解配制成0.4 g/mL的药液。辛伐他汀片20 mg/片，临床常用量为20 mg/d（上海信谊万象药业股份有限公司生产，批号090802），临用时用蒸馏水溶解配制成0.2 mg/mL的药液。丙基硫氧嘧啶，南通精华制药有限公司，批号110301。
1.3 试剂
胆固醇粉（分析纯，25 g/瓶，上海试一化学制剂有限公司，批号091025）；猪油（市场上购回自熬）；蛋黄粉（陕西天斗蛋业有限公司提供，批号100706142）；MMP-9酶联免疫分析（ELlSA）试剂盒，购自武汉博士德生物工程有限公司；SP免疫组化试剂盒及DAB显色剂，购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.4 主要仪器
LD-A5型离心机（北京医用离心机厂生产），722分光光度计（上海第三分析仪器厂），TP-1000电子天平（湘仪天平仪器厂生产），酶标分析仪（型号TELAN SUNRISE，奥地利），MIAS医学图像分析系统（北京航空航天大学科学仪器厂），JEOL-1230型电子显微镜（日本JEOL公司），低温冰箱。
2 实验方法
2.1 分组
40只日本大耳白兔适应性饲养1周，称重并编号，采用随机数字表法随机分为空白对照组、模型组、舒心稳斑颗粒组、辛伐他汀组，每组10只。
2.2 造模
高脂饲料配方：胆固醇1%，猪油5%，蛋黄粉10%，基础饲料84%。将猪油加热溶解后，与胆固醇、蛋黄粉混合，且每100 g高脂饲料中加入20 mg丙基硫氧嘧啶[约按10 mg/（kg·d）计算）]，一并加入基础饲料中拌匀，用饲料制粒机压制成颗粒。参照文献[4-5]，动物称重、编号后，除留作空白对照组的动物外，其余动物给予高脂饲料喂养12周（每只动物每日上午给予高脂饲料100 g），动物造模12周后，随机抽取高脂饲料喂养兔2只处死，取出自心脏至髂主动脉分支处的主动脉标本作冰冻切片，光镜下观察造模情况，以证实产生AS斑块。所有动物自由饮水，继续喂养4周。
2.3 给药
AS模型造模成功后，根据成人70 kg临床用药量按动物体表面积计算给药量。舒心稳斑颗粒组每日灌胃0.53 g/kg（相当于原药材3.17 g/kg）舒心稳斑颗粒，辛伐他汀组每日灌胃1.96 mg/kg辛伐他汀片，空白对照组与高脂模型组每日灌胃生理盐水10 mL/只，均于每日上午给食前灌胃，连续4周。
2.4 标本采集与制备
2.4.1 血液采集与处理 于实验第16周末对家兔禁食12 h（不禁水），次日抽取空腹兔耳中央动脉血6 mL，分置于常规非抗凝生化管中，3000 r/min离心10 min，取上层血清，分装于-20 ℃低温冰箱保存，备用。
2.4.2 标本制备 2%戊巴比妥2 mL/kg耳缘静脉注射麻醉，取升主动脉至主动脉弓约1.5 cm，DEPC处理水洗净，置10%福尔马林中固定，制备石蜡切片（4 μm），用于免疫组织化学染色检测。
2.5 指标检测 采用ELISA测定血清中MMP-9含量，采用SABC法测定主动脉内膜中VEGF表达含量，检测步骤、方法均由专业人员严格按照试剂盒说明书操作。
2.6 结果判定
VEGF免疫反应阳性物质为棕黄色颗粒，在显微镜图像采集分析系统下，每组选取6张切片，每张切片随机观察5个视野，精确选取视野内所有阳性颗粒，计算机自动算出面密度（阳性目标总面积/统计场总面积），用于定量表达免疫组化阳性反应程度。
2.7 病理观察
取主动脉弓约1.5 cm，用10%甲醛溶液固定。常规石蜡包埋后切片，HE染色。在光学显微镜下观察主动脉壁形态结构。
3 统计学方法
采用SPSS18.0统计软件进行分析。实验数据用—x±s表示，先进行方差齐性检验，再采用方差分析。若有差异则进行2组间比较，LSD检验；若方差不齐，采用Tamhane’T2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
4 结果
4.1 一般情况
造模早期个别动物因拒食高脂饲料衰竭而死，部分动物因灌胃操作不慎造成死亡，抽样检测2只表明家兔高脂血症合并AS斑块模型形成。其余死亡的动物均有腹泻症状，观察均可见肛门污秽，解剖检查胃肠明显胀气。故每组检测各项指标时动物数为7～8只不等。最终取得完整资料者进入分析，共31只。
4.2 舒心稳斑颗粒对兔血清中基质金属蛋白酶-9含量的影响
模型组血清中MMP-9含量最高，经过药物干预，舒心稳斑颗粒组和辛伐他汀组MMP-9含量较模型组明显下降，差异有统计学意义（P<0.01）；与辛伐他汀组比较，舒心稳斑颗粒组MMP-9含量差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
4.3 舒心稳斑颗粒对兔主动脉中血管内皮生长因子面密度的影响
主动脉内皮细胞胞膜和胞浆内有棕黄色颗粒为阳性表达。模型组VEGF含量最高，经过药物干预，舒心稳斑颗粒组和辛伐他汀组VEGF水平较模型组明显下降，差异有统计学意义（P<0.01）。与辛伐他汀组比较，舒心稳斑颗粒组VEGF水平差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、图1。
4.4 兔主动脉及粥样硬化斑块病理观察结果
空白对照组主动脉壁厚度较均匀，内膜结构光滑完整，内皮下无泡沫细胞及脂质沉积；模型组主动脉壁增厚，且薄厚不均，形成明显的AS斑块，内皮细胞损伤、脱落，内膜增生，中膜平滑肌细胞呈不规则增生；舒心稳斑颗粒组和辛伐他汀组可见内膜部分增厚，内皮细胞肿胀、变性减轻，泡沫细胞及脂质沉积较模型组减少，而且舒心稳斑颗粒组中沉积的泡沫细胞更少。见图2。
5 讨论
VEGF是有高度特异性的血管内皮细胞生长刺激因子，能特异性地作用于血管内皮细胞，刺激其增殖，促进血管新生的发生，在AS斑块形成过程中发挥着重要作用。VEGF可引起AS斑块内膜微血管的新生，新生的血管也可引起血浆渗出，斑块内出血和血栓形成，加速AS斑块生长、斑块重构及斑块破裂，从而引起急性冠脉综合征（ACS）的发生[6]。研究发现，VEGF可以与人不稳定斑块中的单核细胞、平滑肌细胞和内皮细胞明显共表达，表达区域主要集中在单核细胞浸润明显的斑块纤维帽、肩部以及脂质坏死区边缘新生微血管周围[7]。
MMP-9是一种糖蛋白，可由中性粒细胞、单核细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞等多种细胞分泌。MMP-9与炎症反应关系密切，MMP-9加剧炎症反应，MMP-9表达的上调反映了AS斑块的活跃程度，表明MMP-9在冠脉表达增加对ACS的发生有重要意义，较高的血清MMP-9水平可能提示斑块易损或破裂[8-9]。MMP-9在易损斑块的肩部表达增高更为明显，MMP-9通过降解细胞外基质，降解易损斑块的纤维帽，使纤维帽变薄，斑块破裂，形成血栓，导致ACS[10]。
现代研究表明，痰瘀互结与冠心病的脂质代谢紊乱和血液流变学有关，痰瘀是冠状动脉脂质斑块形成的主要病理基础[11]。痰瘀互结、阻于心络致气血运行不畅而发生冠心病心绞痛，且痰瘀郁久化热，痰、瘀等久恋不去，壅塞络道，郁而蕴蒸，凝聚化毒而内生邪毒。结合西医AS斑块的炎症反应学说，我们认为，冠心病是热毒痰瘀壅阻心络所致，从而使本病缠绵难愈。舒心稳斑颗粒系本课题组治疗冠心病的经验方，由虎杖、血竭、明矾等组成，功能清热解毒、化痰活血。本实验运用高脂高胆固醇饲料造成日本大耳白兔AS模型，该实验在传统的高脂饲料配方中添加了0.2%丙基硫氧嘧啶，这是因为甲状腺素可促进胆固醇在肝内转变为胆汁酸，丙基硫氧嘧啶抑制甲状腺功能，减少对胆固醇的代谢，保证血清胆固醇含量升高，以加速AS斑块形成。实验结果显示，对模型动物采用舒心稳斑颗粒进行治疗后，兔血清中MMP-9含量降低；同时可降低AS斑块中VEGF的表达量；病理观察结果显示，舒心稳斑颗粒干预后，主动脉粥样斑块面积减少、斑块厚度变薄。结果表明，舒心稳斑颗粒通过抑制VEGF在AS斑块中的表达、降低血清中MMP-9含量、抑制斑块内炎症反应，从而减少AS斑块形成。
参考文献：
[1] Li JJ. Silent myocardial may be related to inflammatory response[J]. Med Hypotheses，2004，62（5）：252-256.
[2] 陈礼波，李晓辉，张海港，等.炎症反应对兔腹主动脉粥样硬化形成的影响及其超声检查的评价[J].重庆医学，2009，38（21）：2674-2676.
[3] 王效杰，齐金萍，关宝丽.高脂血症小鼠动脉粥样硬化形成与血管内皮生长因子的关系[J].中国临床康复，2004，8（9）：1766-1767.
[4] 王园园，龙民慧，周磊磊，等.兔动脉粥样硬化动物模型的建立和评价[J].实验动物科学，2008，25（3）：18-21.
[5] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，2006：512-524.
[6] Celletti FL， Hicfiker PR， Ghafowri P， et al. Effect of human recombinant vascular endothelial growth factor 165 on progression of atherosclerotic plaque[J]. J Am Cell Cardinal，2001，103（7）：2126-2130.
[7] 曹勇军，钱进军，刘春风.基质金属蛋白酶-2、-8和血管内皮生长因子在人颈动脉粥样硬化不稳定斑块的定位共表达[J].中华神经外科杂志， 2008，41（2）：102-105.
[8] 马承泰，蒋艳霞，顾华丽，等.急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶-9和超敏C-反应蛋白水平及其相关性分析[J].中国中西医结合急救杂志，2010，17（6）：367-369.
[9] 韩轶鹏，王大明，刘加春，等.血清炎性标志物水平与颈动脉斑块稳定性的相关研究[J].中华外科杂志，2012，50（1）：70-73.
[10] Shu J， Ren N， Du JB， et a1. Increased levels of interleukin-6 and matrix metalloproteinase-9 are of cardiac origin in acute coronary syndrome[J]. Scand Cardiovasc J，2007，41（3）：149-154.
[11] 黎鹏程，程丑夫.论痰瘀是冠状动脉脂质斑块的主要病理基础[J].中医药导报，2012，18（7）：5-6.
（收稿日期：2013-10-29，编辑：华强）
关键词：舒心稳斑颗粒；动脉粥样硬化斑块；血管内皮生长因子；基质金属蛋白酶-9；兔
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）04-0055-04
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是心脑血管疾病的主要病理基础之一。研究表明，炎症反应在AS及其并发症的发生和发展过程中起到重要作用[1]。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）参与AS炎症反应，炎症反应能加速AS形成的进程[2]。血管内皮生长因子（VEGF）促进新生血管形成，高脂血症状态下，内源性VEGF参与血栓形成及内膜增生，促进AS发生发展[3]。本实验通过饲喂高脂饲料制造兔AS模型，观察舒心稳斑颗粒对兔AS斑块中VEGF表达、血清中MMP-9含量及斑块形成的影响，探讨其抗AS的可能作用机制。
1 实验材料
1.1 动物
健康3月龄日本大耳白兔40只，雌雄各半，体质量（2.0±0.2）kg，湖南中医药大学实验动物中心提供。合格证号：湖南省医学实验动物管理委员会医动字20-003号。实验动物环境设施合格证号：湘医动字20-001号。动物进入实验室后单笼喂养，实验前第3日皮下注射兔三联疫苗（齐鲁动物保健品厂，批号1009027），以预防兔瘟。兔用基础饲料由湖南中医大学动物实验中心按标准配方制备后提供。
1.2 药物
舒心稳斑颗粒由血竭、虎杖、瓜蒌壳、明矾等中药组成，采用超微颗粒（湖南春光九汇现代中药有限公司生产），湖南中医药大学附属第一医院药剂科提供，实验所用超微颗粒每克含原药材6 g，临用时用100 ℃开水溶解配制成0.4 g/mL的药液。辛伐他汀片20 mg/片，临床常用量为20 mg/d（上海信谊万象药业股份有限公司生产，批号090802），临用时用蒸馏水溶解配制成0.2 mg/mL的药液。丙基硫氧嘧啶，南通精华制药有限公司，批号110301。
1.3 试剂
胆固醇粉（分析纯，25 g/瓶，上海试一化学制剂有限公司，批号091025）；猪油（市场上购回自熬）；蛋黄粉（陕西天斗蛋业有限公司提供，批号100706142）；MMP-9酶联免疫分析（ELlSA）试剂盒，购自武汉博士德生物工程有限公司；SP免疫组化试剂盒及DAB显色剂，购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.4 主要仪器
LD-A5型离心机（北京医用离心机厂生产），722分光光度计（上海第三分析仪器厂），TP-1000电子天平（湘仪天平仪器厂生产），酶标分析仪（型号TELAN SUNRISE，奥地利），MIAS医学图像分析系统（北京航空航天大学科学仪器厂），JEOL-1230型电子显微镜（日本JEOL公司），低温冰箱。
2 实验方法
2.1 分组
40只日本大耳白兔适应性饲养1周，称重并编号，采用随机数字表法随机分为空白对照组、模型组、舒心稳斑颗粒组、辛伐他汀组，每组10只。
2.2 造模
高脂饲料配方：胆固醇1%，猪油5%，蛋黄粉10%，基础饲料84%。将猪油加热溶解后，与胆固醇、蛋黄粉混合，且每100 g高脂饲料中加入20 mg丙基硫氧嘧啶[约按10 mg/（kg·d）计算）]，一并加入基础饲料中拌匀，用饲料制粒机压制成颗粒。参照文献[4-5]，动物称重、编号后，除留作空白对照组的动物外，其余动物给予高脂饲料喂养12周（每只动物每日上午给予高脂饲料100 g），动物造模12周后，随机抽取高脂饲料喂养兔2只处死，取出自心脏至髂主动脉分支处的主动脉标本作冰冻切片，光镜下观察造模情况，以证实产生AS斑块。所有动物自由饮水，继续喂养4周。
2.3 给药
AS模型造模成功后，根据成人70 kg临床用药量按动物体表面积计算给药量。舒心稳斑颗粒组每日灌胃0.53 g/kg（相当于原药材3.17 g/kg）舒心稳斑颗粒，辛伐他汀组每日灌胃1.96 mg/kg辛伐他汀片，空白对照组与高脂模型组每日灌胃生理盐水10 mL/只，均于每日上午给食前灌胃，连续4周。
2.4 标本采集与制备
2.4.1 血液采集与处理 于实验第16周末对家兔禁食12 h（不禁水），次日抽取空腹兔耳中央动脉血6 mL，分置于常规非抗凝生化管中，3000 r/min离心10 min，取上层血清，分装于-20 ℃低温冰箱保存，备用。
2.4.2 标本制备 2%戊巴比妥2 mL/kg耳缘静脉注射麻醉，取升主动脉至主动脉弓约1.5 cm，DEPC处理水洗净，置10%福尔马林中固定，制备石蜡切片（4 μm），用于免疫组织化学染色检测。
2.5 指标检测 采用ELISA测定血清中MMP-9含量，采用SABC法测定主动脉内膜中VEGF表达含量，检测步骤、方法均由专业人员严格按照试剂盒说明书操作。
2.6 结果判定
VEGF免疫反应阳性物质为棕黄色颗粒，在显微镜图像采集分析系统下，每组选取6张切片，每张切片随机观察5个视野，精确选取视野内所有阳性颗粒，计算机自动算出面密度（阳性目标总面积/统计场总面积），用于定量表达免疫组化阳性反应程度。
2.7 病理观察
取主动脉弓约1.5 cm，用10%甲醛溶液固定。常规石蜡包埋后切片，HE染色。在光学显微镜下观察主动脉壁形态结构。
3 统计学方法
采用SPSS18.0统计软件进行分析。实验数据用—x±s表示，先进行方差齐性检验，再采用方差分析。若有差异则进行2组间比较，LSD检验；若方差不齐，采用Tamhane’T2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
4 结果
4.1 一般情况
造模早期个别动物因拒食高脂饲料衰竭而死，部分动物因灌胃操作不慎造成死亡，抽样检测2只表明家兔高脂血症合并AS斑块模型形成。其余死亡的动物均有腹泻症状，观察均可见肛门污秽，解剖检查胃肠明显胀气。故每组检测各项指标时动物数为7～8只不等。最终取得完整资料者进入分析，共31只。
4.2 舒心稳斑颗粒对兔血清中基质金属蛋白酶-9含量的影响
模型组血清中MMP-9含量最高，经过药物干预，舒心稳斑颗粒组和辛伐他汀组MMP-9含量较模型组明显下降，差异有统计学意义（P<0.01）；与辛伐他汀组比较，舒心稳斑颗粒组MMP-9含量差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
4.3 舒心稳斑颗粒对兔主动脉中血管内皮生长因子面密度的影响
主动脉内皮细胞胞膜和胞浆内有棕黄色颗粒为阳性表达。模型组VEGF含量最高，经过药物干预，舒心稳斑颗粒组和辛伐他汀组VEGF水平较模型组明显下降，差异有统计学意义（P<0.01）。与辛伐他汀组比较，舒心稳斑颗粒组VEGF水平差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、图1。
4.4 兔主动脉及粥样硬化斑块病理观察结果
空白对照组主动脉壁厚度较均匀，内膜结构光滑完整，内皮下无泡沫细胞及脂质沉积；模型组主动脉壁增厚，且薄厚不均，形成明显的AS斑块，内皮细胞损伤、脱落，内膜增生，中膜平滑肌细胞呈不规则增生；舒心稳斑颗粒组和辛伐他汀组可见内膜部分增厚，内皮细胞肿胀、变性减轻，泡沫细胞及脂质沉积较模型组减少，而且舒心稳斑颗粒组中沉积的泡沫细胞更少。见图2。
5 讨论
VEGF是有高度特异性的血管内皮细胞生长刺激因子，能特异性地作用于血管内皮细胞，刺激其增殖，促进血管新生的发生，在AS斑块形成过程中发挥着重要作用。VEGF可引起AS斑块内膜微血管的新生，新生的血管也可引起血浆渗出，斑块内出血和血栓形成，加速AS斑块生长、斑块重构及斑块破裂，从而引起急性冠脉综合征（ACS）的发生[6]。研究发现，VEGF可以与人不稳定斑块中的单核细胞、平滑肌细胞和内皮细胞明显共表达，表达区域主要集中在单核细胞浸润明显的斑块纤维帽、肩部以及脂质坏死区边缘新生微血管周围[7]。
MMP-9是一种糖蛋白，可由中性粒细胞、单核细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞等多种细胞分泌。MMP-9与炎症反应关系密切，MMP-9加剧炎症反应，MMP-9表达的上调反映了AS斑块的活跃程度，表明MMP-9在冠脉表达增加对ACS的发生有重要意义，较高的血清MMP-9水平可能提示斑块易损或破裂[8-9]。MMP-9在易损斑块的肩部表达增高更为明显，MMP-9通过降解细胞外基质，降解易损斑块的纤维帽，使纤维帽变薄，斑块破裂，形成血栓，导致ACS[10]。
现代研究表明，痰瘀互结与冠心病的脂质代谢紊乱和血液流变学有关，痰瘀是冠状动脉脂质斑块形成的主要病理基础[11]。痰瘀互结、阻于心络致气血运行不畅而发生冠心病心绞痛，且痰瘀郁久化热，痰、瘀等久恋不去，壅塞络道，郁而蕴蒸，凝聚化毒而内生邪毒。结合西医AS斑块的炎症反应学说，我们认为，冠心病是热毒痰瘀壅阻心络所致，从而使本病缠绵难愈。舒心稳斑颗粒系本课题组治疗冠心病的经验方，由虎杖、血竭、明矾等组成，功能清热解毒、化痰活血。本实验运用高脂高胆固醇饲料造成日本大耳白兔AS模型，该实验在传统的高脂饲料配方中添加了0.2%丙基硫氧嘧啶，这是因为甲状腺素可促进胆固醇在肝内转变为胆汁酸，丙基硫氧嘧啶抑制甲状腺功能，减少对胆固醇的代谢，保证血清胆固醇含量升高，以加速AS斑块形成。实验结果显示，对模型动物采用舒心稳斑颗粒进行治疗后，兔血清中MMP-9含量降低；同时可降低AS斑块中VEGF的表达量；病理观察结果显示，舒心稳斑颗粒干预后，主动脉粥样斑块面积减少、斑块厚度变薄。结果表明，舒心稳斑颗粒通过抑制VEGF在AS斑块中的表达、降低血清中MMP-9含量、抑制斑块内炎症反应，从而减少AS斑块形成。
参考文献：
[1] Li JJ. Silent myocardial may be related to inflammatory response[J]. Med Hypotheses，2004，62（5）：252-256.
[2] 陈礼波，李晓辉，张海港，等.炎症反应对兔腹主动脉粥样硬化形成的影响及其超声检查的评价[J].重庆医学，2009，38（21）：2674-2676.
[3] 王效杰，齐金萍，关宝丽.高脂血症小鼠动脉粥样硬化形成与血管内皮生长因子的关系[J].中国临床康复，2004，8（9）：1766-1767.
[4] 王园园，龙民慧，周磊磊，等.兔动脉粥样硬化动物模型的建立和评价[J].实验动物科学，2008，25（3）：18-21.
[5] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，2006：512-524.
[6] Celletti FL， Hicfiker PR， Ghafowri P， et al. Effect of human recombinant vascular endothelial growth factor 165 on progression of atherosclerotic plaque[J]. J Am Cell Cardinal，2001，103（7）：2126-2130.
[7] 曹勇军，钱进军，刘春风.基质金属蛋白酶-2、-8和血管内皮生长因子在人颈动脉粥样硬化不稳定斑块的定位共表达[J].中华神经外科杂志， 2008，41（2）：102-105.
[8] 马承泰，蒋艳霞，顾华丽，等.急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶-9和超敏C-反应蛋白水平及其相关性分析[J].中国中西医结合急救杂志，2010，17（6）：367-369.
[9] 韩轶鹏，王大明，刘加春，等.血清炎性标志物水平与颈动脉斑块稳定性的相关研究[J].中华外科杂志，2012，50（1）：70-73.
[10] Shu J， Ren N， Du JB， et a1. Increased levels of interleukin-6 and matrix metalloproteinase-9 are of cardiac origin in acute coronary syndrome[J]. Scand Cardiovasc J，2007，41（3）：149-154.
[11] 黎鹏程，程丑夫.论痰瘀是冠状动脉脂质斑块的主要病理基础[J].中医药导报，2012，18（7）：5-6.
（收稿日期：2013-10-29，编辑：华强）