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目的 构建含胰十二指肠同源框-1基因(pancreatic and duodenal homeobox factor 1,PDX1)的重组腺病毒载体,并检测其在人脐带间充质干细胞(human umblic cord msenchymal stem cells,HUCMSCs)的表达情况。方法 用BgⅢ/XhoI酶从pUC57-PDX1酶切PDX1,连接到pShuttle-GFP-CMV重组穿梭载体,得到pShuttle-GFP-CMV-PDX1重组穿梭质粒,再将pShuttle-GFP-CMV-PDX1转移到pAdxsi载体上,得到pAdxsi-GFP-PDX1病毒质粒,利用脂质体介导重组腺病毒载体转染293细胞,包装出完整的腺病毒。用重组腺病毒感染HUCMSCs 24 h 后,经荧光显微镜、RT-PCR、免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等检测PDXI基因及蛋白的表达。结果通过测序、酶切等鉴定PDXI基因正确插入穿梭质粒中,并与病毒骨架质粒重组,重组腺病毒可高效转染HUCMSCs,RT-PCR检测到PDXI mRNA在HUCMSCs中表达,经免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等证实转染PDXI在HUCMSCs胞核中表达。结论成功构建了PDX1腺病毒载体,并在HUCMSCs中有效表达。