腺病毒载体介导PDX1在人脐带间充质干细胞中的表达

来源 :中华内分泌外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sfsfsfsdfsdfsdfsd
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 构建含胰十二指肠同源框-1基因(pancreatic and duodenal homeobox factor 1,PDX1)的重组腺病毒载体,并检测其在人脐带间充质干细胞(human umblic cord msenchymal stem cells,HUCMSCs)的表达情况。方法 用BgⅢ/XhoI酶从pUC57-PDX1酶切PDX1,连接到pShuttle-GFP-CMV重组穿梭载体,得到pShuttle-GFP-CMV-PDX1重组穿梭质粒,再将pShuttle-GFP-CMV-PDX1转移到pAdxsi载体上,得到pAdxsi-GFP-PDX1病毒质粒,利用脂质体介导重组腺病毒载体转染293细胞,包装出完整的腺病毒。用重组腺病毒感染HUCMSCs 24 h 后,经荧光显微镜、RT-PCR、免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等检测PDXI基因及蛋白的表达。结果通过测序、酶切等鉴定PDXI基因正确插入穿梭质粒中,并与病毒骨架质粒重组,重组腺病毒可高效转染HUCMSCs,RT-PCR检测到PDXI mRNA在HUCMSCs中表达,经免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等证实转染PDXI在HUCMSCs胞核中表达。结论成功构建了PDX1腺病毒载体,并在HUCMSCs中有效表达。
其他文献
目的 通过在针刺配合中药熏蒸治疗骨性关节炎的过程中开展护理工作,评价骨性关节炎的护理工作的临床有效性及可行性.方法 在针刺配合中药熏蒸治疗骨性关节炎的过程中取得显著
信息技术教育的主要目的是让学生了解计算机文化,进而掌握基本的计算机知识和技能,激发学习兴趣,为其他学科的学习提供有力的辅助学习(教学)工具.本文对初中信息技术教育的策
随着我国经济的飞速发展,作为我国国民经济的支柱产业之一的建筑业,也发生着日新月异的变化。伴随着建筑业的快速发展,对于建筑物的安全性的要求也越来越高。而岩土工程作为建筑
本文主要是对近些年来我国在地质勘探和基础工程方面取得的进展做了综合研究,并分析了地质勘探和基础工程的发展趋势,以供建筑业内人士参考。
在我国一次性能源结构中,煤炭能源长期是我国的主要能源,煤炭工业能否健康发展是事关我国能源的安全和经济是否可持续发展的重大问题。目前,我国的煤炭产量和消费已经占据了世界
母线是保护变电站安全运行的重要因素,在故障发生时,可以迅速切断短路故障,最大程度减少事故波及范围,防止事故对电气设备带来毁灭性的损害,以此确保电网运行安全稳定。本文针对变
通过对海阳核电一期工程1#、2#核岛屏蔽墙电气贯穿件套筒图纸及设计文件,以及有关技术规范的使用说明,并针对现场实际施工环境条件,经现场勘验,会议讨论等手段,最终确定了合理可行
瓦斯和煤的突出对矿井的安全起着十分重要的影响,也是我们关注的热点之一,本文主要是从被保护层开采的效果检验和局部瓦斯治理技术的应用两个方面进行探讨。
目的:观察Carriere Distalizer矫治器在安氏Ⅱ类骨性Ⅰ类错(牙合)畸形患者前期治疗的应用效果.方法:选择安氏Ⅱ类骨性Ⅰ类错12例.上颌粘结Carriere distalizer矫治器,下颌双
治疗牙周病需要采用系统的治疗方法及健康指导.洁治术是治疗和预防牙周病的必要措施,是牙周病基础治疗的重点,洁治完善与否直接影响下一步牙周治疗的效果.