论文部分内容阅读
目的
评价hsa_circ_0025853在低温减轻神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞)氧糖剥夺-复糖复氧损伤中的作用。
方法体外培养SK-N-SH细胞至对数生长期,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(C组)、氧糖剥夺-复糖复氧组(OGD/R组)、低温组(H组)、hsa_circ_0025853干扰RNA(siRNA)+低温组(S+H组)。C组细胞在正常条件下培养;OGD/R组氧糖剥夺3 h后复糖复氧24 h;H组氧糖剥夺3 h后,在32 ℃低温下复糖复氧24 h。S+H组在氧糖剥夺-复糖复氧模型制备前48 h转染siRNA序列,余同H组。于复糖复氧24 h时,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR法检测线粒体动力相关蛋白1(Drp1) mRNA、hsa_circ_0025853表达,Western blot法检测Drp1表达水平。
结果与C组比较,其余3组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,hsa_circ_0025853表达下调,Drp1及其mRNA表达上调(P<0.05);与OGD/R组比较,H组和S+H组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,hsa_circ_0025853表达上调,Drp1及其mRNA表达下调(P<0.05)。与H组比较,S+H组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,hsa_circ_0025853表达下调,Drp1及其mRNA表达上调(P<0.05)。
结论低温减轻SK-N-SH细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤的机制与上调hsa_circ_0025853的表达,从而降低Drp1水平有关。