【摘 要】
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本研究拟通过分析丁酸钠对脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞系(MAC?T细胞)炎性损伤的修复作用,进一步从体外角度阐述丁酸钠对奶牛乳腺健康的调控机制.在MAC?T细胞中添加不同浓度(0、1、10、100、1000、10000 ng/mL)的LPS,检测细胞活力,以确定LPS的适宜浓度,建立细胞氧化损伤模型;并进一步在MAC?T细胞中添加不同浓度(0、2、4、8、16、32μmol/L)的丁酸钠,检测细胞凋亡率,以确定丁酸钠的适宜浓度.最终选用1000 ng/mL LPS和16μmol/L丁酸钠用于本试
【机 构】
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邢台学院生物科学与工程学院,邢台 054001;河北医科大学附属邢台人民医院病理科,邢台 054001
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本研究拟通过分析丁酸钠对脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞系(MAC?T细胞)炎性损伤的修复作用,进一步从体外角度阐述丁酸钠对奶牛乳腺健康的调控机制.在MAC?T细胞中添加不同浓度(0、1、10、100、1000、10000 ng/mL)的LPS,检测细胞活力,以确定LPS的适宜浓度,建立细胞氧化损伤模型;并进一步在MAC?T细胞中添加不同浓度(0、2、4、8、16、32μmol/L)的丁酸钠,检测细胞凋亡率,以确定丁酸钠的适宜浓度.最终选用1000 ng/mL LPS和16μmol/L丁酸钠用于本试验.试验分为3组,分别为对照组、LPS处理组和LPS+丁酸钠处理组,分别对其细胞形态、氧化应激指标及凋亡蛋白mRNA表达水平进行检测.结果表明:1)对照组MAC?T细胞呈扁平的无规则形态,贴壁状态良好;而LPS处理组MAC?T细胞核固缩、破裂,并出现大面积死亡脱落现象;LPS+丁酸钠处理组MAC?T细胞边缘清楚,胞内颗粒较少,死亡脱落现象明显减少.2)与对照组相比,LPS处理组MAC?T细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化力(T?AOC)显著降低(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);与LPS处理组相比,LPS+丁酸钠处理组MAC?T细胞中SOD活性和T?AOC含量显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05).3)与对照组相比,LPS处理组MAC?T细胞中半胱天冬蛋白酶-3(Caspase?3)、半胱天冬蛋白酶-9(Caspase?9)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl?2)mRNA表达水平极显著降低(P<0.01);与LPS处理组相比,LPS+丁酸钠处理组MAC?T细胞中Caspase?3、Caspase?9 mRNA表达水平显著下降(P<0.05),Bcl?2 mRNA表达水平显著升高(P<0.05).由此可见,丁酸钠对LPS造成的MAC?T细胞氧化损伤起到了一定的修复作用,减少了细胞凋亡的发生.
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