人α防御素5在大肠杆菌中的可溶性表达与纯化研究

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采用PCR扩增大肠杆菌偏好的人α防御素5成熟肽(mHD-5)密码子序列,并将其克隆至pMAL—p2x质粒,构建pMAL-p2x-mHD-5表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白表达量并优化表达条件。经亲和层析、酶切和离子交换层析等方法分离、纯化重组mHD-5(rmHD-5)多肽。采用浊度法测定rmHD-5对细菌的抑制活性。通过优化表达条件,获得约30%的可溶性目的蛋白表达量,并成功纯化rmHD-5。rmHD-5对大肠杆菌标准菌株(ATCC25922)具有较强的抑制
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