【摘 要】
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根据肠炎沙门氏菌(SE)种特异性DNA序列,设计合成了一对能特异性扩增130bp片段的引物和TaqMan探针,首次建立了SE的种特异性荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)诊断方法。该法在SEDNA含
【机 构】
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四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,动物疫病与人类健康四川省重点实验室
【基金项目】
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国家“十一五”科技支撑计划(2007Z06-017);教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-04-0906/NCET-04-0818);四川省基础研究重大项目(04JY029-006-1/2006J13-049);四川省重点建设学科(SZD0418)资助项目
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根据肠炎沙门氏菌(SE)种特异性DNA序列,设计合成了一对能特异性扩增130bp片段的引物和TaqMan探针,首次建立了SE的种特异性荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)诊断方法。该法在SEDNA含量为9×10^8-9X104拷贝有较好的线性关系;检测SEDNA模板的灵敏度为4拷贝/μL,检测SE细菌数的灵敏度为6CFU/mL;特异性试验表明只对SE基因组呈阳性反应。分别应用该技术和传统细菌分离法检测60份来自人工感染鸭、小白鼠和肉兔的心、肝、脑和直肠粪便,结果显示两种方法对心、肝、直肠粪便的
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