【摘 要】
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为初步建立一种能快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的胶体金免疫层析试纸条检测技术,本试验通过原核表达、纯化获得ASFV pK205R蛋白,制备兔抗多克隆抗体。根据胶体金免疫层析原理,用金颗粒标记纯化的兔抗pK205R抗体作为金标垫,同时纯化的抗体作为检测线(T线)捕获抗原,用葡萄球菌A蛋白(SPA)作为质控线(C线),经过对工作条件的优化,实现ASFV胶体金检测试纸条的制备。结果显示,原核表达的ASFV pK205R蛋白约为44 kDa,金标抗体的最佳标记量约为40μg/mL,最佳pH为7.5,T线抗体标记
【机 构】
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成都农业科技职业学院,四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室
【基金项目】
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2020年成都市技术创新研发项目(2019-YF05-00119-SN),成都农业科技职业学院2020年院级科研基金项目(20ZR101)。
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为初步建立一种能快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的胶体金免疫层析试纸条检测技术,本试验通过原核表达、纯化获得ASFV pK205R蛋白,制备兔抗多克隆抗体。根据胶体金免疫层析原理,用金颗粒标记纯化的兔抗pK205R抗体作为金标垫,同时纯化的抗体作为检测线(T线)捕获抗原,用葡萄球菌A蛋白(SPA)作为质控线(C线),经过对工作条件的优化,实现ASFV胶体金检测试纸条的制备。结果显示,原核表达的ASFV pK205R蛋白约为44 kDa,金标抗体的最佳标记量约为40μg/mL,最佳pH为7.5,T线抗体标记
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