【摘 要】
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目的建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库,经过扩增和筛选,得到目的抗体.方法自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pCom
【机 构】
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710038,第四军医大学细胞工程中心
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目的建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库,经过扩增和筛选,得到目的抗体.方法自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中,建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库.然后利用肝癌抗原HAb18GE进行筛选,并对抗体库的扩增和筛选条件进行优化.结果 pComb3展示抗体库在37℃进行扩增挽救时存在明显的目的片段重组丢失现象.pComb3X展示抗体库在不同的扩增条件下均未发现明显的重组丢失现象.经过4轮筛选后,噬菌体展示抗体ELISA显示,鉴定克隆与原
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