观察探讨音猬因子(Shh)信号转导通路在缺氧诱导的人视网膜色素上皮(hRPE)细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达中的作用。

hRPE-19细胞分为正常对照组(Cont组)、缺氧组。缺氧组加入100 μmol/L CoCl₂再分为缺氧对照组(CoCl₂组)、cyclopamine处理组(CYA组)、二甲基亚砜对照组(DMSO组)。CYA组于造成缺氧前1 h加入20 μmol/L的cyclopamine进行预处理；DMSO组加入1‰DMSO。各组细胞培养4、8、12、24 h。采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞内Shh、VEGF mRNA的表达；酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测细胞培养上清液中VEGF蛋白含量。

RT-PCT检测结果显示，缺氧刺激4、8、12、24 h，缺氧组细胞内Shh、VEGF mRNA表达逐渐增高，与Cont组细胞内Shh(F＝45.260)、VEGF mRNA(F＝264.938)表达比较，差异有统计学意义(P＝0.001)。CYA组细胞内Shh、VEGF mRNA表达与CoCl₂组比较，差异均有统计学意义(P<0.01)；DMSO组细胞内Shh、VEGF mRNA表达与CoCl₂组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。ELISA检测结果显示，CoCl₂组细胞培养上清液中VEGF蛋白含量与Cont组比较，差异有统计学意义(F＝3 156.676，P＝0.001)。CYA组细胞培养上清液中VEGF蛋白含量较CoCl₂组明显降低，差异均有统计学意义(P<0.01)。

Shh信号转导通路可能参与了缺氧引起的hRPE细胞中VEGF的表达。