目的 探讨去甲基化制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胰腺癌细胞系MiaPaca2生长的影响,以及对RUNX3抑癌基因表达和甲基化的影响.方法 光镜观察5-Aza-CdR处理前后MiaPaca2细胞形态学变化,四甲基偶氮唑蓝法检测5-Aza-CdR对MiaPaca2细胞增殖活性的影响,半定量逆转录聚合酶链反应检测RUNX3 mRNA表达的变化,甲基化特异性聚合酶链反应检测RUNX3基因甲基化的变化.结果 经2.5、5、10和20 μmol/L 5-Aza-CdR处理24h后,MiaPaca2细胞的抑制率分别为(9.17 ±2.15)％、(10.75 ±2.04)％、(12.57±1.64)％和(18.70±1.51)％;48 h后分别为(14.94±1.68)％、(18.60±1.57)％、(22.84±1.58)％和(33.24±1.53)％；72 h后分别为(21.46±1.60)％、(28.62±1.72)％、(35.14±1.64)％和(45.06±1.47)％；96 h后分别为(26.35±1.71)％、(34.48±1.69)％、(40.05 ±1.60)％和(49.99±1.61)％.各实验组与对照组抑制率比较,差异均有统计学意义(均P ＜0.05).在同一时点,各浓度组间MiaPaca2细胞的抑制率差异均有统计学意义(均P＜0.05).在48、72、96h时,各浓度组抑制率两两比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).在药物处理24h以后,5-Aza-CdR对MiaPaca2细胞的生长抑制作用随着5-Aza-CdR浓度的增加而增强.5-Aza-CdR能够逆转RUNX3基因的甲基化状态,恢复RUNX3 mRNA的表达.结论 RUNX3基因甲基化状态与胰腺癌的发生发展密切相关,异常甲基化可能是引起RUNX3基因表达缺失的重要机制.5-Aza-CdR可以逆转MiaPaca2细胞RUNX3基因的甲基化状态,重新激活其表达,从而抑制肿瘤细胞的生长,为胰腺癌的诊断和治疗提供了一条新途径.
5-氮杂-2\'-脱氧胞苷对人胰腺癌细胞系MiaPaca2生长和RUNX3基因甲基化的影响
【摘 要】
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目的 探讨去甲基化制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胰腺癌细胞系MiaPaca2生长的影响,以及对RUNX3抑癌基因表达和甲基化的影响.方法 光镜观察5-Aza-CdR处理前后MiaPaca2细胞形态学变化,四甲基偶氮唑蓝法检测5-Aza-CdR对MiaPaca2细胞增殖活性的影响,半定量逆转录聚合酶链反应检测RUNX3 mRNA表达的变化,甲基化特异性聚合酶链反应检测RUNX3
【机 构】
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(235000淮北市矿工总医院普通外科),(300192天津市第一中心医院普通外科),(300192天津市第一中心医院普通外科),(300192天津市第一中心医院普通外科),(卫生部危重病急救医学重点
【出 处】
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中华肿瘤杂志
【发表日期】
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2013年35期
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