【摘 要】
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目的:探讨Th2细胞因子IL-13是否直接介导足细胞损伤,并初步探讨其作用机制. 方法:RT-PCR和免疫组化方法检测温度敏感的小鼠足细胞系(HSMP)上IL-13受体的mRNA和蛋白质表达.使
【机 构】
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第二军医大学临床学院南京军区南京总医院解放军肾脏病研究所,南京,210002;
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目的:探讨Th2细胞因子IL-13是否直接介导足细胞损伤,并初步探讨其作用机制. 方法:RT-PCR和免疫组化方法检测温度敏感的小鼠足细胞系(HSMP)上IL-13受体的mRNA和蛋白质表达.使用不同浓度(10 ng/ml,50 ng/ml,100 ng/ml)的IL-13干预足细胞不同时间(8h、12h、24h),免疫荧光法分析足细胞骨架相关蛋白F-actin和细胞间连接蛋白ZO-1的变化情况.并进一步应用Western blot方法检测细胞内信号通路STAT 6的磷酸化水平,探讨IL-13损伤足细胞的作用机制. 结果:HSMP上存在IL-13 Ⅰ型受体mRNA和蛋白质表达.骨架蛋白F-actin和ZO-1的染色结果显示:IL-13可呈剂量和时间依赖性对足细胞造成损伤.50ng/ml IL-13作用24h即可造成足细胞明显损伤.F-actin变细、紊乱,向细胞边缘聚集;ZO-1明显减弱和断裂.进一步的研究还表明,IL-13可诱导足细胞内细胞因子相关的STAT 6信号通路的活化.STAT 6信号通路特异性抑制剂leflunomide可阻断IL-13对足细胞骨架蛋白结构和细胞间连接蛋白的影响. 结论:足细胞表面存在IL-13受体,IL-13可通过与其受体结合损伤足细胞的骨架结构和细胞间连接蛋白.IL-13对足细胞的损伤作用与STAT 6信号通路的活化有关.
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