【摘 要】
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目的:用霍乱毒素亚单位B结合荧光素488和594(cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488,594,CTB-Alexa 488,594)双标记示踪技术揭示"京骨"和"大钟"穴在大鼠
【机 构】
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中国中医科学院针灸研究所; 山东中医药大学;
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(“973”计划)资助项目(No.2010CB530507);国家自然科学基金资助项目(81072759);国家人力资源和社会保障部回国留学人员科技项目(No.2009);中国中医科学院自主选题研究项目(No.2009Z02024)
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目的:用霍乱毒素亚单位B结合荧光素488和594(cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488,594,CTB-Alexa 488,594)双标记示踪技术揭示"京骨"和"大钟"穴在大鼠神经系统中的特异性联系,探讨原络配穴的神经解剖学基础。方法:用微量注射器将0.1%CTB-Alexa 488和CTB-Alexa 594两种示踪剂各5μL分别注入3只雄性SD大鼠后肢"京骨"和"大钟"穴区。72 h后将动物灌流固定,取出脑、脊髓和脊神经节,并制成组织切片,然后直接用荧光显微镜系统观察和记录被标记的神经元。结果:在相应的激发光下,CTB-Alexa 488和594标记的神经元分别呈绿色和红色,双重标记的神经元呈黄色,均位于示踪剂注入侧的相关神经组织中。在所标记到的神经元中,与"京骨"和"大钟"穴相关联的感觉神经元集中在L4~L5脊神经节,少量分布在L3和L6脊神经节,其中双标的感觉神经元主要出现在L4~L5脊神经节;与两穴相关联的运动神经元以L4~L5节段为中心呈柱状分布在L3~L6节段脊髓前角第Ⅸ层的后外侧部。结论:应用CTB-Alexa 488和594荧光双标记示踪技术观察到了与原穴"京骨"和络穴"大钟"相关的感觉和运动神经元在脊神经节和脊髓的分布规律。
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