【摘 要】
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衣藻是用来研究植物光合作用和动物纤毛常用的模式生物。为了研究蛋白质之间的相互作用,利用SMART技术构建了衣藻的酵母双杂交文库。使用Trizol试剂提取鞭毛再生过程和光周期
【机 构】
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清华大学生命科学学院细胞骨架与信号转导实验室
【基金项目】
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高等学校博士学科点专项科研基金项目;清华大学自主科研计划(2010THZO)
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衣藻是用来研究植物光合作用和动物纤毛常用的模式生物。为了研究蛋白质之间的相互作用,利用SMART技术构建了衣藻的酵母双杂交文库。使用Trizol试剂提取鞭毛再生过程和光周期培养的细胞进入分裂前的衣藻细胞的总RNA,经过Oligotex纯化得到mRNA;应用SMART技术和LD-PCR合成双链cDNA,经过CHROMA SPIN TE-400柱子去除短片段的cDNA;cDNA和线性化载体pGADT7-Rec共转化酵母Y187构建酵母双杂交文库。库容达到3.0×106 CFU,重组率为70%,插入片
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