【摘 要】
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目的 观察HepG2.2.15细胞内HBV核心蛋白的亚细胞定位及转移,了解核心蛋白的人核机制.方法 2%二甲亚砜或(和)1 μmol/L Bay41-4109处理HepG2.2.15细胞4d;荧光共聚焦显微镜观察
【机 构】
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北京大学人民医院、北京大学肝病研究所
【基金项目】
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北京大学人民医院研究与发展基金;国家自然科学基金
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目的 观察HepG2.2.15细胞内HBV核心蛋白的亚细胞定位及转移,了解核心蛋白的人核机制.方法 2%二甲亚砜或(和)1 μmol/L Bay41-4109处理HepG2.2.15细胞4d;荧光共聚焦显微镜观察HBsAg和HBcAg在细胞内的定位;Western blot检测胞质和胞核中的HBcAg水平;选择性PCR检测胞核内HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)水平.结果 二甲亚砜处理提高了胞质和胞核内的HBcAg表达及核内的cccDNA水平;Bay41-4109处理后胞质中HBcAg水平下降但胞核中HBcAg水平上升,cccDNA水平下降,联合应用二甲亚砜和Bay41-4109处理后HBsAg在胞质内呈条索状分布,胞质中HBcAg水平下降,但胞核内HBcAg明显上升,cccDNA水平下降.结论 HepG2.2.15细胞中存在HBV核心颗粒人核障碍,游离核心蛋白易于通过核孔,二甲亚砜可促进核心蛋白进入细胞核,并有助于cccDNA的形成.
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