融合蛋白IP10-EGFRvⅢScFv的构建及表达

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：jzaf_com

【摘要】

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目的构建细胞因子融合蛋白IP10-EGFRvⅢScFv,建立并检测稳定表达融合蛋白的细胞株NIH3T3。方法通过RT-PCR法扩增小鼠IP10基因,全基因人工合成EGFRvⅢScFv,两段目的基因依次克

【作者】

：

王旋赵洪洋罗赤星周毅张方成姜晓兵

【机构】

：

华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科

【出处】

：

华中科技大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2012年1期

【关键词】

：

表皮生长因子受体 γ干扰素诱导蛋白10 单链抗体融合蛋白构建表达 EGFR IP10 ScFv fusion protein construct expr

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目的构建细胞因子融合蛋白IP10-EGFRvⅢScFv,建立并检测稳定表达融合蛋白的细胞株NIH3T3。方法通过RT-PCR法扩增小鼠IP10基因,全基因人工合成EGFRvⅢScFv,两段目的基因依次克隆于表达载体pcDNA3.1（-）PCMV启动子下游,二者以编码（Gly4Ser）3的柔性接头序列（linker）相连。将构建好的pcDNA3.1（-）IP10-EGFRvⅢScFv转染NIH3T3细胞,并用G418筛选出阳性克隆,采用实时定量PCR和Western blot法检测克隆细胞目的基因和蛋白的表

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