慢病毒负载GFP转染兔脂肪干细胞的效率及毒性评价

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目的探讨慢病毒负载绿色荧光蛋白(GFP)对兔脂肪干细胞(rADSCs)转染的可行性及稳定性,为rADSCs组织工程化角膜上皮的研究提供可靠的体内外示踪方法。方法以慢病毒作为载体,采用不同感染复数(MOI)慢病毒将GFP基因导入rADSCs,荧光倒置显微镜下观察细胞转染情况,应用MTT法检测慢病毒转染对rADSCs细胞生长的影响,评价细胞毒性。结果当MOI值为50、100、500时,rADSCs均可被成功转染,120 h后转染效率均可达50%以上。当MOI值为50、100时,GFP-慢病毒对rADSCs的生长无明显影响,而MOI值为500时,细胞生长受到明显抑制。结论慢病毒负载GFP可成功导入rADSCs,为进一步对ADSCs组织工程化角膜上皮的研究奠定了良好的实验基础。
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