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构建携带胸苷激酶（tk）与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合基因穿梭质粒，并观察其在肝癌细胞系HepG2细胞中的表达。应用基因重组技术，构建EGFP与tk的融合表达穿梭质粒载体，经限制酶切鉴定和测序分析，脂质体转染将其导入HepG2中，48h后用荧光显微镜观察荧光的表达，RT-PCR法检测融合蛋白tk和EGFP的mRNA表达，四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测转染融合蛋白载体后不同浓度的更昔洛韦（GCV）对HepG2细胞的细胞毒作用。酶切鉴定和测序分析证实重组质粒中插入融合目的基因片断及载体DNA大小、方向