【摘 要】
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目的 探讨TGF-β1、NF-κB通路与自噬间关系,为进一步了解牙齿萌出通道形成过程中骨动态平衡调节机制提供新的实验依据.方法 按照加入NF-κB通路阻断剂SN50和TGF-β1浓度不同,将成骨细胞分为以下12组:NC组:无SN50+无TGF-β1;KD1组:无SN50+TGF-β1(0.01ng/ml);KD2组:无SN50+TGF-β1(100ng/ml);KD3组:SN50(6.25μg/ml)无TGF-β1;KD4组:SN50(6.25μg/ml)+TGF-β1(0.01ng/ml);KD5组:S
【机 构】
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222002 南京医科大学连云港临床医学院口腔科
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目的 探讨TGF-β1、NF-κB通路与自噬间关系,为进一步了解牙齿萌出通道形成过程中骨动态平衡调节机制提供新的实验依据.方法 按照加入NF-κB通路阻断剂SN50和TGF-β1浓度不同,将成骨细胞分为以下12组:NC组:无SN50+无TGF-β1;KD1组:无SN50+TGF-β1(0.01ng/ml);KD2组:无SN50+TGF-β1(100ng/ml);KD3组:SN50(6.25μg/ml)无TGF-β1;KD4组:SN50(6.25μg/ml)+TGF-β1(0.01ng/ml);KD5组:SN50(6.25μg/ml)+TGF-β1(100ng/ml);KD6组:SN50(12.25μg/ml)+无TGF-β1;KD7组:SN50(12.25μg/ml)+TGF-β1(0.01ng/ml);KD8组:SN50(12.25μg/ml)+TGF-β1(100ng/ml);KD9组:SN50(25μg/ml)+无TGF-β1;KD10组:SN50(25μg/ml)+TGF-β1(0.01ng/ml);KD11组:SN50(25μg/ml)+TGF-β1(100ng/ml).单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)法检测自噬小体形成,Simple Western assays法检测LC3a蛋白表达.结果 NF-κB通路未被阻断时,TGF-β1可以上调成骨细胞自噬功能,但与浓度无显著相关性.浓度为25μg/ml SN50阻断NF-κB信号通路后成骨细胞自噬功能明显低于对照组,此时,再次加入TGF-β1不能上调成骨细胞自噬水平.结论 TGF-β1可能通过NF-κB影响成骨细胞的自噬功能,具体分子调控机制需进一步研究.
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