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以迷迭香叶子为原料,采用两步法分离纯化鼠尾草酸,第一步:迷迭香叶经超声辅助乙醇提取,得到迷迭香提取物;第二步:迷迭香提取物经硅胶柱层析,得到鼠尾草酸纯品。单因素试验的结果表明:第二步操作的合理条件为:200-300目硅胶、洗脱剂为乙酸乙酯:石油醚(4:13,v/v)、洗脱剂流速4mL/min、负载量为0.5g。通过此种方法得到的鼠尾草酸纯度≥97%。同时,对实验所得物质进行紫外、红外、核磁、质谱验证,证明所得物质为鼠尾草酸。