【摘 要】
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tRNA源性片段(tRNA-derived fragments,tRFs)和tRNA源性应激诱导RNAs(tRNA-derived stress-induced RNAs,tiRNAs)是tRNAs的衍生片段,属于短的非编码RNA家族,通过转录、翻译、信号通路等途径参与复杂的生物反应.该文旨在验证鸡卵清提取液诱导293T细胞后升高的3个tRFs&tiRNAs分子的细胞功能.将293T细胞加于6孔板中,3个孔加普通培养基,3个孔加50％鸡卵清提取液的培养基,共培养3天.对照组3个样本和诱导组3个样本进行高通
【机 构】
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解放军联勤保障部队第920医院基础医学实验室,昆明650032;干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室,昆明650032;云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室,昆明650032
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tRNA源性片段(tRNA-derived fragments,tRFs)和tRNA源性应激诱导RNAs(tRNA-derived stress-induced RNAs,tiRNAs)是tRNAs的衍生片段,属于短的非编码RNA家族,通过转录、翻译、信号通路等途径参与复杂的生物反应.该文旨在验证鸡卵清提取液诱导293T细胞后升高的3个tRFs&tiRNAs分子的细胞功能.将293T细胞加于6孔板中,3个孔加普通培养基,3个孔加50％鸡卵清提取液的培养基,共培养3天.对照组3个样本和诱导组3个样本进行高通量测序检测tRFs&tiRNAs分子在两组中的差异表达.经检测验证诱导后的细胞有3个tRFs&tiRNAs分子稳定升高.这3个分子上调表达有统计学意义.合成这3个分子转染293T细胞,WB检测多能因子OCT4和NANOG的变化,定量PCR检测多能基因OCT4和NANOG的变化和端粒的相对表达量,流式检测多能因子OCT4和NANOG的变化.同时检测这3个分子转染293T细胞后细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的变化情况.结果 表明,3个分子转染293T细胞后,WB检测到多能因子OCT4和NANOG表达对比未转染细胞明显升高,定量PCR检测多能基因OCT4和NANOG相对表达量对比未转染细胞明显升高,端粒对比未转染细胞明显增长.流式检测到多能因子OCT4和NANOG阳性表达细胞对比未转染细胞明显增多.这3个分子转染293T细胞后细胞活性增强,细胞凋亡减少,细胞周期也发生了一定的改变.该研究证明了这3个分子过表达可促进293T细胞多能因子OCT4和NANOG表达升高,促进端粒增长,使细胞年轻化.同时这3个分子过表达可使细胞活性增强,细胞凋亡减少.
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