探讨胶质瘤细胞中IKKε对E-cadherin表达的调控作用及其对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。
方法构建IKKε过表达载体及IKKε shRNA慢病毒，以IKKε过表达质粒转染TP483胶质瘤细胞株，上调胶质瘤细胞中IKKε的表达水平；以IKKε shRNA慢病毒转染U251、U138胶质瘤细胞株，下调胶质瘤细胞中IKKε的表达水平。采用RT-PCR和Western blot检测细胞中IKKε及E-cadherin的表达；应用免疫荧光法观察转染后IKKε及E-cadherin表达的变化。通过划痕实验和Transwell法分别检测细胞的迁移和侵袭能力。
结果与未转染组(TP483对照组)相比，转染IKKε的过表达质粒组(TP483处理组)的IKKε蛋白的表达水平升高(P＝0.000)，而E-cadherin蛋白的表达水平降低(P＝0.000)。转染IKKε shRNA的胶质瘤细胞(U251处理组和U138处理组)中IKKε蛋白的表达水平较未转染组(U251对照组和U138对照组)明显降低(均P<0.05)，同时各处理组E-cadherin蛋白的表达水平均较其对照组升高(均P<0.05)。TP483处理组划痕修复率较对照组高[(56.39±0.93)%对比(46.43±1.68)%，P＝0.035)]。过表达质粒转染24 h后，TP483处理组穿过滤膜的细胞数目较对照组增加[(55.8±6.0)个对比(24.6±2.3)个，P＝0.000]。U251、U138处理组划痕修复率较其各自的对照组降低[U251处理组：(50.40±1.09)%，U251对照组：(87.29±11.11)%，P＝0.043；U138处理组：(48.20±1.34)%，U138对照组：(73.15±6.62)%，P＝0.035)]。IKKε shRNA转染24 h后，U251、U138处理组穿过滤膜的细胞数目较对照组少([U251处理组：(77.8±6.4)个，U251对照组：(124.0±13.4)个，P＝0.000；U138处理组：(25.8±4.2)个，U138对照组：(54.8±7.1)个，P＝0.000]。
结论IKKε低表达可有效抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移，而IKKε高表达可增强其侵袭和迁移能力。其可能的机制是通过调节E-cadherin的表达水平从而影响胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。