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目的 建立一种血清孕酮测定候选参考方法.方法 以[3,4-13C2]孕酮为内标,用正己烷提取血清,以羟丙基-β-环糊精水溶液对提取液作净化处理,用七氟丁酸酐对孕酮进行衍生化.用气相色谱分离衍生产物,质谱选择离子监测模式检测孕酮与内标的特定碎片离子,用包括法定量.结果 血清孕酮测定的总变异系数为0.69%～2.12%,平均分析回收率为98.3%～100.1%.分析血清孕酮标准物质,测定结果与靶值的偏差小于1.5%.结论 建立的同位素稀释气相色谱质谱测定血清孕酮的方法,准确、精密,可望作为测定血清孕酮的参考方法。