目的:建立同时测定不同产地蔓性千斤拔药材中染料木素-4′,7-二-O-葡萄糖苷、大豆苷元-7-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素-6-C-葡萄糖苷、5,4’-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃木糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷、染料木苷5个异黄酮类化合物含量的高效液相色谱法。方法:采用Diamonsil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长258 nm,柱温30℃。结果:染料木素4′,7-二-O-葡萄糖苷、大豆苷元-7-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素-6-C-葡萄糖苷、5,4’-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃木糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷和染料木苷进样量分别在0.033⁰.656μg（r=0.999 7）、0.010⁰.204μg（r=0.999 5）、0.034⁰.687μg（r=0.999 9）、0.012⁰.244μg（r=0.999 7）和0.086¹.725μg（r=0.999 9）范围内与峰面积呈现良好的线性关系;平均回收率（n=6）分别为98.11%、94.27%、93.17%、93.13%和98.97%,RSD分别为1.0%、1.6%、1.4%、1.4%和1.8%。测得染料木素4′,7-二-O-葡萄糖苷、大豆苷元-7-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素-6-C-葡萄糖苷、5,4’-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃木糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷和染料木苷的样品含量分别为0.112⁰.192、0.047⁰.072、0.110⁰.170、0.074⁰.115和0.437⁰.703 mg·g^-1。结论:经方法学验证,本法可用于蔓性千斤拔药材的质量控制。