【摘 要】
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对影响花生遗传转化效率的PPT筛选压、根癌农杆菌的侵染浓度、侵染及共培养时间等因素进行研究,采用农杆菌转化花生叶片,成功地将抗虫基因豇豆蛋白酶抑制基因(CpTI)和耐除草
【机 构】
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广东汕头大学生物系,仲凯农业技术学院,广东汕头农业科学研究所
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对影响花生遗传转化效率的PPT筛选压、根癌农杆菌的侵染浓度、侵染及共培养时间等因素进行研究,采用农杆菌转化花生叶片,成功地将抗虫基因豇豆蛋白酶抑制基因(CpTI)和耐除草剂基因(Bar)导入花生.实验结果表明,外植体在MS+3mg/L BA+0.8mg/L NAA+2mg/L AgNO3+6mg/L Gln培养基上预培养3d,于OD600为0.3的农杆菌菌液中浸泡5～7min后培养2d,再转移至含有3mg/L BA+0.8mg/L NAA+2mg/L AgNO3+6mg/L Gln+500mg/L Cb+300mg/L Cef+0.25mg/L PPT的MS培养基诱导筛选培养,3个月后得到24个再生株系.经PCR初步检测,有7个株系显示了310bp的CpTI基因核酸片段,Southern杂交证实了5个株系有外源基因的整合.
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