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摘 要：本实验对白芷配方颗粒的质量标准进行研究。含量测定方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-水（5：55：40）为流动相，检测波长为304nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，欧前胡素在0.005～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。结论：本法简便、准确，可作为白芷配方颗粒的质量标准。
关键词：白芷配方颗粒;质量标准;研究
白芷始载于东汉《神农本草经》，性温，味辛，气芳香，微苦。白芷具有祛风湿，活血排脓，生肌止痛的功效。《本草经百种录》记载："凡驱风之药，未有不枯耗精液者，白芷极香，能驱风燥湿，其质又极滑润，能和利血脉，而不枯耗，用之则有利无害者也。盖古人用药，既知药性之所长，又度药性之所短，而后相人之气血，病之标木，参合研求，以定取舍，故能有显效而无隐害，此学者之所殚心也。"白芷常用于头痛、牙痛、鼻渊、痈疽疮疡、皮肤瘙痒等。《纲目》记载："治鼻渊、鼻衄、齿痛、眉棱骨痛，大肠风秘，小便出血，妇人血风眩运，翻胃吐食;解砒毒，蛇伤，刀箭金疮。"近年来的研究表明白芷具有镇痛、抗菌、平喘、兴奋运动等方面的药理作用。本实验对白芷配方颗粒的质量标准进行研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器：BN-ES电子分析天平0.0001g电子天平（昆山巨天仪器设备有限公司）;L-3000四元低压自动进样高效液相色谱系统（上海添时科学仪器有限公司）;TP720 TP720紫外可见近红外分光光度计（上海荆和分析仪器有限公司）;ZXTA-20双极反渗透实验室超纯水机（北京卓信博澳仪器有限公司）;HH·S21-8-S双列八孔数显电热恒温水浴锅（广州航信科学仪器有限公司）;DHG-9240A电热恒温鼓风干燥箱（上海和呈仪器制造有限公司）;实验室高纯水机（上海技舟化工科技有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：欧前胡素对照品（中国药品生物制品检定所）。
1.4 试剂：甲醇（天津市凯力达化工贸易有限公司）、乙腈（天津市凯力达化工贸易有限公司）、无水乙醇（天津市凯力达化工贸易有限公司）、磷酸二氢钾（重庆亚翔龙生物医药有限公司）、磷酸（天津市凯力达化工贸易有限公司）、氢氧化钠（天津市凯力达化工贸易有限公司）。
1.5 试药：白芷配方颗粒
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
分别考察乙腈-甲醇-水（5：45：50），乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾（含0.5%三乙胺，用磷酸调节pH至4.0）（30：70），甲醇-0.08%磷酸溶液（25：75），乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（60：40），甲醇-磷酸盐缓冲液（取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量，用氢氧化钠试液调节pH值至5.0）（72：28），乙腈-甲醇-水（10：2：88），乙腈-甲醇-水（15：15∶70），乙腈-甲醇-水（5：55：40）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-水（5：55：40）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-水（5：55：40）为流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[7-12]。流动相：乙腈-甲醇-水（5：55：40）为流动相，检测波长：304nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按欧前胡素峰计算应不得低于2000。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取欧前胡素对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含0.02mg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取白芷配方颗粒适量，研细，精密称定，加20毫升乙醚超声提取30分钟，过滤，蒸干滤液，残渣加流动溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4 专属性试验
取輔料按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.77%，表明本方法精密度良好。
2.6 对照品的线性考察
精密称取适量欧前胡素对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含0.005、0.01、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2毫克的溶液。分别精密上述溶液吸取20μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，欧前胡素在0.005～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7 重现性试验
称取同一批的白芷配方颗粒样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.86%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 准确度试验
取对照品适量分别精密加入白芷配方颗粒中，按含量测定进行测定，计算回收率为99.6%，RSD为0.61%。
3 结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于白芷配方颗粒中欧前胡素的含量测定。
参考文献
[1]朱艺欣，李宝莉，马宏胜，刘永仙.白芷的有效成分提取、药理作用及临床应用研究进展[J].中国医药导报.2014（31）.
[2]Synthesis and Vasorelaxant Activity of New Coumarin and Furocoumarin Derivatives[J]. Manuel Campos-Toimil，Francisco Orallo，Lourdes Santana，Eugenio Uriarte.Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters.2002（5）.
[3]王梦月，贾敏如，马逾英，蒋桂华，唐声武，夏露.不同入药部分及不同加工方法对白芷香豆素类成分含量的影响[J].中药材，2004（11）.
[4]雷云，王威，史洋，翟华强，杨洪军，许海玉.基于化学指纹图谱和多指标成分含量测定的白芷质量评价[J].中国实验方剂学杂志，2015（02）.
[5]王鸣，孙浩，冯煦，顾红梅，张建华.RP-HPLC测定杭白芷不同部位5种香豆素的含量[J].中国野生植物资源，2013（04）.
[6]舒翔，叶小春，陈军，谢岱，徐宏峰，林世和，余南才，刘合刚.高效液相色谱法同时测定白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量[J].中国医院药学杂志，2017（05）.
关键词：白芷配方颗粒;质量标准;研究
白芷始载于东汉《神农本草经》，性温，味辛，气芳香，微苦。白芷具有祛风湿，活血排脓，生肌止痛的功效。《本草经百种录》记载："凡驱风之药，未有不枯耗精液者，白芷极香，能驱风燥湿，其质又极滑润，能和利血脉，而不枯耗，用之则有利无害者也。盖古人用药，既知药性之所长，又度药性之所短，而后相人之气血，病之标木，参合研求，以定取舍，故能有显效而无隐害，此学者之所殚心也。"白芷常用于头痛、牙痛、鼻渊、痈疽疮疡、皮肤瘙痒等。《纲目》记载："治鼻渊、鼻衄、齿痛、眉棱骨痛，大肠风秘，小便出血，妇人血风眩运，翻胃吐食;解砒毒，蛇伤，刀箭金疮。"近年来的研究表明白芷具有镇痛、抗菌、平喘、兴奋运动等方面的药理作用。本实验对白芷配方颗粒的质量标准进行研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器：BN-ES电子分析天平0.0001g电子天平（昆山巨天仪器设备有限公司）;L-3000四元低压自动进样高效液相色谱系统（上海添时科学仪器有限公司）;TP720 TP720紫外可见近红外分光光度计（上海荆和分析仪器有限公司）;ZXTA-20双极反渗透实验室超纯水机（北京卓信博澳仪器有限公司）;HH·S21-8-S双列八孔数显电热恒温水浴锅（广州航信科学仪器有限公司）;DHG-9240A电热恒温鼓风干燥箱（上海和呈仪器制造有限公司）;实验室高纯水机（上海技舟化工科技有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：欧前胡素对照品（中国药品生物制品检定所）。
1.4 试剂：甲醇（天津市凯力达化工贸易有限公司）、乙腈（天津市凯力达化工贸易有限公司）、无水乙醇（天津市凯力达化工贸易有限公司）、磷酸二氢钾（重庆亚翔龙生物医药有限公司）、磷酸（天津市凯力达化工贸易有限公司）、氢氧化钠（天津市凯力达化工贸易有限公司）。
1.5 试药：白芷配方颗粒
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
分别考察乙腈-甲醇-水（5：45：50），乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾（含0.5%三乙胺，用磷酸调节pH至4.0）（30：70），甲醇-0.08%磷酸溶液（25：75），乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（60：40），甲醇-磷酸盐缓冲液（取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量，用氢氧化钠试液调节pH值至5.0）（72：28），乙腈-甲醇-水（10：2：88），乙腈-甲醇-水（15：15∶70），乙腈-甲醇-水（5：55：40）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-水（5：55：40）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-水（5：55：40）为流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[7-12]。流动相：乙腈-甲醇-水（5：55：40）为流动相，检测波长：304nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按欧前胡素峰计算应不得低于2000。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取欧前胡素对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含0.02mg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取白芷配方颗粒适量，研细，精密称定，加20毫升乙醚超声提取30分钟，过滤，蒸干滤液，残渣加流动溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4 专属性试验
取輔料按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.77%，表明本方法精密度良好。
2.6 对照品的线性考察
精密称取适量欧前胡素对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含0.005、0.01、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2毫克的溶液。分别精密上述溶液吸取20μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，欧前胡素在0.005～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7 重现性试验
称取同一批的白芷配方颗粒样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.86%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 准确度试验
取对照品适量分别精密加入白芷配方颗粒中，按含量测定进行测定，计算回收率为99.6%，RSD为0.61%。
3 结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于白芷配方颗粒中欧前胡素的含量测定。
参考文献
[1]朱艺欣，李宝莉，马宏胜，刘永仙.白芷的有效成分提取、药理作用及临床应用研究进展[J].中国医药导报.2014（31）.
[2]Synthesis and Vasorelaxant Activity of New Coumarin and Furocoumarin Derivatives[J]. Manuel Campos-Toimil，Francisco Orallo，Lourdes Santana，Eugenio Uriarte.Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters.2002（5）.
[3]王梦月，贾敏如，马逾英，蒋桂华，唐声武，夏露.不同入药部分及不同加工方法对白芷香豆素类成分含量的影响[J].中药材，2004（11）.
[4]雷云，王威，史洋，翟华强，杨洪军，许海玉.基于化学指纹图谱和多指标成分含量测定的白芷质量评价[J].中国实验方剂学杂志，2015（02）.
[5]王鸣，孙浩，冯煦，顾红梅，张建华.RP-HPLC测定杭白芷不同部位5种香豆素的含量[J].中国野生植物资源，2013（04）.
[6]舒翔，叶小春，陈军，谢岱，徐宏峰，林世和，余南才，刘合刚.高效液相色谱法同时测定白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量[J].中国医院药学杂志，2017（05）.