【摘 要】
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子宫内膜炎是奶牛养殖业常见的一种繁殖疾病,目前主要利用抗生素进行治疗.本试验利用已成功构建的子宫内膜细胞炎症模型,研究添加1μmol/L虾青素对脂多糖(LPS)诱导奶牛子宫内膜细胞调亡的影响,处理24 h后利用流式细胞仪检测细胞的凋亡比例,利用荧光定量RT-PCR和Western Blot分别检测Bax、Bcl-2、Fas、Caspase 8、Caspase 3基因的mRNA和蛋白表达水平,并利用酶标仪检测培养液中FasL含量.结果表明,脂多糖(LPS)作用子宫内膜细胞6 h后,细胞凋亡比例显著增加(P<
【机 构】
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山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东 济南 250100;邹城市畜牧业发展中心,山东 邹城 273500
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子宫内膜炎是奶牛养殖业常见的一种繁殖疾病,目前主要利用抗生素进行治疗.本试验利用已成功构建的子宫内膜细胞炎症模型,研究添加1μmol/L虾青素对脂多糖(LPS)诱导奶牛子宫内膜细胞调亡的影响,处理24 h后利用流式细胞仪检测细胞的凋亡比例,利用荧光定量RT-PCR和Western Blot分别检测Bax、Bcl-2、Fas、Caspase 8、Caspase 3基因的mRNA和蛋白表达水平,并利用酶标仪检测培养液中FasL含量.结果表明,脂多糖(LPS)作用子宫内膜细胞6 h后,细胞凋亡比例显著增加(P<0.05);线粒体介导的促凋亡关键基因Bax表达升高(P<0.05),抗凋亡基因Bcl-2表达降低(P<0.05);Fas/FasL信号通路的关键基因Fas、Caspase 8表达升高(P<0.05),FasL蛋白水平也显著升高(P<0.05);凋亡执行效应酶Caspase 3基因表达显著升高(P<0.05).说明LPS从线粒体和Fas/FasL两条通路诱导子宫内膜细胞发生凋亡.加入1μmol/L虾青素培养细胞24 h后,细胞凋亡比例显著下降(P<0.05);Bax、Fas、Caspase 8和Caspase 3表达水平均显著降低(P<0.05),Bcl-2表达水平显著升高(P<0.05),说明虾青素通过线粒体和Fas/FasL两条信号通路抑制LPS诱导的子宫内膜细胞凋亡.本试验可为奶牛子宫内膜炎的预防和治疗提供理论参考.
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