【摘 要】
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目的:探讨刚地弓形虫肌动蛋白profilin(TgPRF)的原核表达体系和纯化条件,为后续的抗肿瘤免疫佐剂研究提供依据。方法:以弓形虫RH株速殖子的cDNA为模板,采用一对特定的引物扩
【机 构】
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吉林大学第一医院转化医学研究院移植免疫实验室,吉林大学第二医院检验科
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目的:探讨刚地弓形虫肌动蛋白profilin(TgPRF)的原核表达体系和纯化条件,为后续的抗肿瘤免疫佐剂研究提供依据。方法:以弓形虫RH株速殖子的cDNA为模板,采用一对特定的引物扩增TgPRF基因的编码区。PCR产物双酶切后克隆入pET28a(+)载体中。重组的pET28a(+)TgPRF质粒转化EcoliDH5α感受态细胞。双酶切鉴定阳性克隆,并选取测序正确的质粒转化EcoliBL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达4h,SDSPAGE法检测TgPRF蛋白的表达,Western blotting
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