论文部分内容阅读
目的 研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因过表达对人胆管癌细胞生长的影响.方法构建逆转录病毒-TNF-α(pLNCX-TNF-α)复合体,转染人胆管癌细胞得到稳定表达,通过聚合酶链式反应(PCR)、流式细胞仪(FCM)、免疫组织化学等方法检测基因表达、细胞生长增殖和细胞凋亡等情况.结果 pLNCX-TNF-α基因转染人胆管癌细胞后,pLNCX空质粒转染组、pLNCX-TNF-α基因转染组的细胞均能扩增出708 bp的基因片断,而未转染组则无;pLNCX-TNF-α基因转染组的细胞克隆抑制率为64%,与对照组和pLNCX空质粒转染组相比,差异性非常显著(P<0.01);转染的人胆管癌细胞G1期比例从29.07%增加到54.24%,G2-M期和S期比例分别从52.03%下降到2.02%、18.32%下降到10.34%;凋亡细胞数从5.83%增加到34.76%.结论 TNF-α基因通过诱导肿瘤细胞发生凋亡并导致其发生G1期阻滞在肿瘤基因治疗方面发挥作用。