【摘 要】
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目的 由于常规10%中性甲醛固定的组织DNA提取质量较低,易发生断裂或降解,不利于保存及长片段DNA扩增.本研究比较70%乙醇与中性甲醛固定法对DNA质量及后续PCR的影响.方法 取70
【机 构】
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广东省人民医院医学研究中心,广东省医学科学院肺癌研究所
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目的 由于常规10%中性甲醛固定的组织DNA提取质量较低,易发生断裂或降解,不利于保存及长片段DNA扩增.本研究比较70%乙醇与中性甲醛固定法对DNA质量及后续PCR的影响.方法 取70%乙醇固定的肺癌组织30例(其中10例固定7天以上),10%中性甲醛固定的自身配对癌组织30份.采用试剂盒提取DNA,分析条带完整性和纯度,并用PCR扩增HBB(beta globin)及SERPINA9(an-titrypsin)两基因的不同长度片段,用琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物.结果 70%乙醇固定组的基因组DNA经电泳条带整齐未见明显降解,而10%中性甲醛组DNA条带弥散,有可见降解.后续普通PCR扩增268 bp、536 bp的产物显示乙醇同定组产量明显高于10%中性甲醛固定组.实时荧光定量PCR也显示在扩增123 bp、251 bp、346 bp三个不同长度片段时乙醇同定组产量均明显高于10%中性甲醛固定组(P
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