【摘 要】
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根据甜蛋白莫奈林的氨基酸序列,选择酵母偏爱密码子,化学合成单链莫奈林(Single-Chain Monellin,SCM)基因片段,并拼接成全基因. 基因的DNA序列分析表明,合成的单链莫奈林基因
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根据甜蛋白莫奈林的氨基酸序列,选择酵母偏爱密码子,化学合成单链莫奈林(Single-Chain Monellin,SCM)基因片段,并拼接成全基因. 基因的DNA序列分析表明,合成的单链莫奈林基因与设计的一致.该基因插入于毕赤氏酵母整合型质粒pPIC9K中置于AOXI启动子的控制下,并通过电转化技术将重组质粒pPIC9K/SCM导入Pichia pastoris,在含有G418的YEPD平板上筛选整合型的多拷贝的转化子.转化子在BMMY培养基中经甲醇诱导表达,用SDS-PAGE检测发酵液,表明SCM的分泌
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