论文部分内容阅读
摘要：以红掌叶片为外植体材料，对红掌组织培养技术进行研究。结果表明利用幼嫩叶片诱导愈伤组织适宜的激素配比为6-BA2.0+IAA0.1；愈伤组织增殖培养适宜的激素配比为6-BA2.0+NAA0.3；诱导生根适宜激素浓度是NAA0.3。
关键词：红掌；组织培养；快繁
中图分类号：S682.14 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2010）-11-0040-2
红掌（Anthurium andraeanum）属天南星科花烛属多年生草本花卉，因其花型独特，花色鲜艳丰富，花期持久，且周年开花而成为备受欢迎的名贵花卉[1]。红掌目前已成为花卉市场上的主打品种，市场需求量大，传统繁殖方法已不能满足市场需要。因此采用组织培养快繁技术是红掌大量、快速、整齐一致繁殖种苗的一条有效途径[2]。
本试验以红掌叶片为材料，研究不同激素水平对红掌愈伤组织诱导、增殖和生根的影响，旨在为红掌组织快繁提供技术支持和参考依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料为福州黎明职业技术学院园林苗圃的盆栽品种
1.2 外植体的制备
在晴天，取红掌幼苗刚展开的叶片，用自来水冲洗30分钟，在无菌条件下，用75%酒精浸泡15秒作表面消毒处理，再用0.1%升汞消毒10分钟，消毒过程可轻轻摇动，再用无菌滤纸吸干，然后用无菌蒸馏水冲洗5遍，最后用无菌滤纸吸干表明水分[2，3]，用解剖刀和镊子切取0.6-0.8cm方块接种到培养瓶中，每瓶接种1个叶片。
1.3愈伤组织的诱导
试验采取的诱导愈伤组织的培养基为MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+PH5.8,附加不同浓度的6-BA和IAA组合，见表1，每种处理接种30个，重复三次，培养50d，统计愈伤组织的诱导率，观察愈伤组织的颜色和质地。
1.4 愈伤组织的增殖
采用培养基为MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+PH5.8,附加不同浓度的6-BA和NAA组合，见表2,待愈伤组织长到1×1cm左右时，将其切成0.3×0.3cm转移到到增殖培养基上，每瓶接种一个愈伤组织，每种培养基接种30瓶，培养50d，统计不定芽的增殖量。
1.5 生根培养
在增殖培养基中待不定芽长出3片叶以上的植株移到生根培养基中诱导生根，每瓶接种4个，每种浓度接种20瓶，培养基为MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+PH5.8，采用不同激素浓度培养基[4]，见表3，统计生根的时间和每株出根的数量。
1.6培养条件
培养温度为25-27℃，每天光照10-12h，光照强度为1500-2000Lx。
2 结果与分析
2.1 外植体愈伤组织的诱导
将外植体接种到诱导培养后，15天后可观察到叶片切口处开始逐渐膨大产生愈伤组织。在四种培养基中，发现3号培养基诱导的愈伤组织快，膨大速度快，愈伤组织呈绿色，质地紧密，诱导率最高，90.0%；1号培养基诱导率为70.0%，次之，愈伤组织呈黄绿色，质地疏松；2号和4号培养诱导率分别为33.3%和36.7%，都较低，愈伤组织黄色，质地疏松[5，6，7]。
表1 不同浓度6-BA和IAA对红掌愈伤组织的影响
培养基 6-BA
mg/L IAA
mg/L 外植体数
(个) 培养50d愈伤
组织数（个） 诱导率
（%） 愈伤组织
颜色、质地
1 1.0 0.1 30 21 70.0% 黄绿色、紧密
2 1.0 0.5 30 10 33.3% 黄色、疏松
3 2.0 0.1 30 27 90.0% 绿色、紧密
4 2.0 0.5 30 11 36.7% 黄色、疏松
2.2 愈伤组织的增殖
将以诱导的愈伤组织切成0.3×0.3cm小块转移到到增殖培养基上，能分化长成不定芽，50天后能长成2-4cm左右的小苗。在几种不同激素配比浓度中，发现7号培养基平均分化芽数为21，不定芽最多，长得最快，且有少量根系和气生根形成，苗也粗壮，整个生长势好。8号培养平均分化芽数是18，5号和6号培养基分化芽数都较少[6,7,8]。
表2 不同浓度6-BA和NAA对红掌愈伤组织增殖的影响
培养基 6-BA
(mg/L) NAA
(mg/L) 接種愈伤
组织数(个) 培养50d
不定芽（个） 平均芽数
（个）
5 1.0 0.3 30 450 15
6 1.0 0.5 30 330 11
7 2.0 0.3 30 630 21
8 2.0 0.5 30 540 18
2.3 生根诱导
在增殖培养基中待不定芽长出3片叶以上丛生芽分株接种到生根培养基中，培养一周后，基部开始出现白色根尖，随后逐渐变长，一个月后生根达最佳，即可移栽。三种浓度的培养基都能达到生根的效果，其中以NAA浓度0.3mg/L，生根速度最快，平均生根数量最多，根系长而粗壮，可见生根效果是最好的。
表2 不同浓度NAA对红掌生根诱导的影响
培养基 NAA
(mg/L) 接种株数
(个) 开始长根
时间（d） 30d
形成根数（条） 平均根数（条） 根苗状态
9 0.1 30 15 19 4.8 长而粗壮
10 0.3 30 9 32 8.0 长而粗壮
11 0.5 30 11 25 6.3 长而粗壮
3 小结
利用外植体获得愈伤组织是红掌组培快繁的关键步骤，愈伤组织诱导成功与否与外植体的取材部位、消毒方法、诱导培养基都有密切关系[1]。本研究表明，利用红掌幼嫩叶片诱导愈伤组织增殖实现红掌快速繁殖是一种有效措施。在组培快繁中，生长调节物质的作用很重要，可以是单一激素，也可以配合利用多种激素，关键是要找到适合的激素配比[9]。本研究表明，利用幼嫩叶片诱导愈伤组织适宜的激素配比为6-BA2.0+IAA0.1；愈伤组织增殖培养适宜的激素配比为6-BA2.0+NAA0.3，诱导生根适宜激素浓度是NAA0.3。本实验是在其他因素一致条件下，通过调节激素浓度和配比达到组培快繁的最佳效果，旨在为本地区红掌组织快繁提供技术支持和参考依据。
参考文献
[1] 陈海,黄小江,林思诚,等．红掌组织培养和快速繁殖技术[J]．广西热带农业,2009,（3）:6-8．
[2] 苏荣存,薛玉剑,张红,等．火鹤花的组培与快繁研究[J]．北方园艺,2006,（2）:121-122．
[3] 肖三元,梁国平．红掌组织培养及快速繁殖[J]．云南热作科技,2000,23（2）：12-13．
[4] 高雷，赵卫国，莫东发.红掌组培苗的生根与移栽技术研究[J]．山东林业科技,2008,1:23-25．
[5] 蔡维藩．红掌组织培养与快速繁殖[J].亚热带植物科学, 2002,31（3）:66-68．
[6] 司亮．红掌组织培养技术的研究[J]．中国林副特产, 2009,3：41-42．
[7] 束晓春,彭峰,李乃伟．红掌组织培养研究[J]．江苏农业科技,2009,2：67-68．
[8] 聂振朋．红掌组织培养与快速繁殖技术综述[J]．园艺博览,2008,22:84-86．
[9] 崔锡明，林思诚，柯沛强．两种外源激素在白掌组织培养不同阶段的剂量研究[J]．广东林业科技,2004,20(2):20-22．
作者简介：江宝月（1980-），女，福建闽侯人，福州黎明职业技术学院助教，硕士，研究方向：园林技术专业教学。
关键词：红掌；组织培养；快繁
中图分类号：S682.14 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2010）-11-0040-2
红掌（Anthurium andraeanum）属天南星科花烛属多年生草本花卉，因其花型独特，花色鲜艳丰富，花期持久，且周年开花而成为备受欢迎的名贵花卉[1]。红掌目前已成为花卉市场上的主打品种，市场需求量大，传统繁殖方法已不能满足市场需要。因此采用组织培养快繁技术是红掌大量、快速、整齐一致繁殖种苗的一条有效途径[2]。
本试验以红掌叶片为材料，研究不同激素水平对红掌愈伤组织诱导、增殖和生根的影响，旨在为红掌组织快繁提供技术支持和参考依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料为福州黎明职业技术学院园林苗圃的盆栽品种
1.2 外植体的制备
在晴天，取红掌幼苗刚展开的叶片，用自来水冲洗30分钟，在无菌条件下，用75%酒精浸泡15秒作表面消毒处理，再用0.1%升汞消毒10分钟，消毒过程可轻轻摇动，再用无菌滤纸吸干，然后用无菌蒸馏水冲洗5遍，最后用无菌滤纸吸干表明水分[2，3]，用解剖刀和镊子切取0.6-0.8cm方块接种到培养瓶中，每瓶接种1个叶片。
1.3愈伤组织的诱导
试验采取的诱导愈伤组织的培养基为MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+PH5.8,附加不同浓度的6-BA和IAA组合，见表1，每种处理接种30个，重复三次，培养50d，统计愈伤组织的诱导率，观察愈伤组织的颜色和质地。
1.4 愈伤组织的增殖
采用培养基为MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+PH5.8,附加不同浓度的6-BA和NAA组合，见表2,待愈伤组织长到1×1cm左右时，将其切成0.3×0.3cm转移到到增殖培养基上，每瓶接种一个愈伤组织，每种培养基接种30瓶，培养50d，统计不定芽的增殖量。
1.5 生根培养
在增殖培养基中待不定芽长出3片叶以上的植株移到生根培养基中诱导生根，每瓶接种4个，每种浓度接种20瓶，培养基为MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+PH5.8，采用不同激素浓度培养基[4]，见表3，统计生根的时间和每株出根的数量。
1.6培养条件
培养温度为25-27℃，每天光照10-12h，光照强度为1500-2000Lx。
2 结果与分析
2.1 外植体愈伤组织的诱导
将外植体接种到诱导培养后，15天后可观察到叶片切口处开始逐渐膨大产生愈伤组织。在四种培养基中，发现3号培养基诱导的愈伤组织快，膨大速度快，愈伤组织呈绿色，质地紧密，诱导率最高，90.0%；1号培养基诱导率为70.0%，次之，愈伤组织呈黄绿色，质地疏松；2号和4号培养诱导率分别为33.3%和36.7%，都较低，愈伤组织黄色，质地疏松[5，6，7]。
表1 不同浓度6-BA和IAA对红掌愈伤组织的影响
培养基 6-BA
mg/L IAA
mg/L 外植体数
(个) 培养50d愈伤
组织数（个） 诱导率
（%） 愈伤组织
颜色、质地
1 1.0 0.1 30 21 70.0% 黄绿色、紧密
2 1.0 0.5 30 10 33.3% 黄色、疏松
3 2.0 0.1 30 27 90.0% 绿色、紧密
4 2.0 0.5 30 11 36.7% 黄色、疏松
2.2 愈伤组织的增殖
将以诱导的愈伤组织切成0.3×0.3cm小块转移到到增殖培养基上，能分化长成不定芽，50天后能长成2-4cm左右的小苗。在几种不同激素配比浓度中，发现7号培养基平均分化芽数为21，不定芽最多，长得最快，且有少量根系和气生根形成，苗也粗壮，整个生长势好。8号培养平均分化芽数是18，5号和6号培养基分化芽数都较少[6,7,8]。
表2 不同浓度6-BA和NAA对红掌愈伤组织增殖的影响
培养基 6-BA
(mg/L) NAA
(mg/L) 接種愈伤
组织数(个) 培养50d
不定芽（个） 平均芽数
（个）
5 1.0 0.3 30 450 15
6 1.0 0.5 30 330 11
7 2.0 0.3 30 630 21
8 2.0 0.5 30 540 18
2.3 生根诱导
在增殖培养基中待不定芽长出3片叶以上丛生芽分株接种到生根培养基中，培养一周后，基部开始出现白色根尖，随后逐渐变长，一个月后生根达最佳，即可移栽。三种浓度的培养基都能达到生根的效果，其中以NAA浓度0.3mg/L，生根速度最快，平均生根数量最多，根系长而粗壮，可见生根效果是最好的。
表2 不同浓度NAA对红掌生根诱导的影响
培养基 NAA
(mg/L) 接种株数
(个) 开始长根
时间（d） 30d
形成根数（条） 平均根数（条） 根苗状态
9 0.1 30 15 19 4.8 长而粗壮
10 0.3 30 9 32 8.0 长而粗壮
11 0.5 30 11 25 6.3 长而粗壮
3 小结
利用外植体获得愈伤组织是红掌组培快繁的关键步骤，愈伤组织诱导成功与否与外植体的取材部位、消毒方法、诱导培养基都有密切关系[1]。本研究表明，利用红掌幼嫩叶片诱导愈伤组织增殖实现红掌快速繁殖是一种有效措施。在组培快繁中，生长调节物质的作用很重要，可以是单一激素，也可以配合利用多种激素，关键是要找到适合的激素配比[9]。本研究表明，利用幼嫩叶片诱导愈伤组织适宜的激素配比为6-BA2.0+IAA0.1；愈伤组织增殖培养适宜的激素配比为6-BA2.0+NAA0.3，诱导生根适宜激素浓度是NAA0.3。本实验是在其他因素一致条件下，通过调节激素浓度和配比达到组培快繁的最佳效果，旨在为本地区红掌组织快繁提供技术支持和参考依据。
参考文献
[1] 陈海,黄小江,林思诚,等．红掌组织培养和快速繁殖技术[J]．广西热带农业,2009,（3）:6-8．
[2] 苏荣存,薛玉剑,张红,等．火鹤花的组培与快繁研究[J]．北方园艺,2006,（2）:121-122．
[3] 肖三元,梁国平．红掌组织培养及快速繁殖[J]．云南热作科技,2000,23（2）：12-13．
[4] 高雷，赵卫国，莫东发.红掌组培苗的生根与移栽技术研究[J]．山东林业科技,2008,1:23-25．
[5] 蔡维藩．红掌组织培养与快速繁殖[J].亚热带植物科学, 2002,31（3）:66-68．
[6] 司亮．红掌组织培养技术的研究[J]．中国林副特产, 2009,3：41-42．
[7] 束晓春,彭峰,李乃伟．红掌组织培养研究[J]．江苏农业科技,2009,2：67-68．
[8] 聂振朋．红掌组织培养与快速繁殖技术综述[J]．园艺博览,2008,22:84-86．
[9] 崔锡明，林思诚，柯沛强．两种外源激素在白掌组织培养不同阶段的剂量研究[J]．广东林业科技,2004,20(2):20-22．
作者简介：江宝月（1980-），女，福建闽侯人，福州黎明职业技术学院助教，硕士，研究方向：园林技术专业教学。