结肠癌肝转移灶人PRL-3基因的扩增与克隆

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目的 从人结肠癌肝转移病灶标本中提取染色体RNA,聚合酶链反应(PCR)扩增及克隆人PRL-3基因.方法收集人结肠癌肝转移标本,提取总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增PRL-3序列,A-T克隆于pMD-18T载体中,转化大肠杆菌JM109株,提取质粒,对重组质粒进行酶切与测序鉴定.结果通过酶切、PCR与测序3种方法证实所获得的基因片断为PRL-3基因.结论克隆到序列正确的人源性PRL-3基因,为实现PRL-3基因的高效表达及制备相应抗体奠定了基础。

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