【摘 要】
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目的采用生物化学方法从植物内生真菌代谢物中筛选细菌β-酰胺酶抑制剂。方法克隆β-内酰胺酶KPC-2、TEM-10和NDM-1基因至表达载体pET28；纯化重组蛋白质，以此为药靶，从植物内生
【基金项目】
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江苏省科技厅国际合作项目基金(编号:SBZ200900212);江苏师范大学科研基金(项目编号:11XLA19);徐州市创新生物医药高技术重点实验室项目(编号:XF11C035)
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目的采用生物化学方法从植物内生真菌代谢物中筛选细菌β-酰胺酶抑制剂。方法克隆β-内酰胺酶KPC-2、TEM-10和NDM-1基因至表达载体pET28；纯化重组蛋白质，以此为药靶，从植物内生真菌代谢产物库中高通量筛选β-内酰胺酶抑制物；检测效应物对β-内酰胺类药物的增效效应。结果成功克隆了3个目的基因，纯化了重组蛋白质至纯度80．95％；从3752种真菌提取液中筛选确定了5个对3种纯化的β-内酰胺酶活性均有抑制的效应物，其中效应物PF000，212能够使美罗培南对3株携带NDM—l基因的临床分离“超级细菌”
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