双歧杆菌对新生大鼠坏死性小肠结肠炎肠损伤及肠道菌群影响

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目的 建立新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型,探讨添加双歧杆菌对新生大鼠.NEC模型肠损伤的保护作用及肠道菌群的影响,为应用双歧杆菌防治NEC提供依据.方法 SD新生大鼠出生48h开始给予鼠配方奶人工喂养,100%氮气缺氧90s,4℃冷刺激10min,每天2次,连续3d,建立新生SD大鼠:NEC模型.按析因设计,32只新生SD大鼠随机分成4组,每组动物各8只.A组为:NEC模型组并在出生48h起每日给予长双歧杆菌灌胃(1×108CFU/d);B组为NEC模型组,C组为对照组,都未添加双歧杆菌;D组为对照组并给予长双歧杆菌灌胃(1×108cFU/d).在最后一次缺氧、冷刺激后24h空腹断头处死大鼠,留取回盲部近端肠管组织进行肠组织损伤评分,组织学评分≥2确定为NEC;实验前后留取各组新生鼠粪便,按照张秀荣方法进行肠道菌群检测.应用Kruskal-Wallis H检验等方法进行统计学分析,α=0.05为显著性检验标准.结果 开始造模后,A、B组新生SD大鼠相继出现腹泻、腹胀、萎靡、活动减少,A组程度较轻.A、B、C和D组肠组织损伤评分(x±s)分别为1.88±0.84、3.13±O.84、0.63±0.52、0.50±0.54,各组间肠组织损伤评分差异有显著性,与B组相比,A组肠组织损伤评分明显降低,但仍高于C、D两组,差异均有显著性.各组实验前肠道细菌总数,杆菌、球菌数,G+杆菌、G+球菌数差异均无显著性,肠道菌群中杆球菌比值在正常范围中.实验结束时,各组间新生鼠肠道细菌总数,杆菌、球菌数,杆球菌比值,G+杆菌、G+球菌数及其占肠道总菌群数的比率差异均有显著性;除B组杆菌数外,与实验前相比,各组新生大鼠实验结束后肠道细菌总数、球菌数、杆菌数、G+杆菌数、G+球菌数均有显著增加,差异均有显著性;A、B组肠道杆球菌比值和G+杆菌数占肠道总菌群数比率均明显下降,A组下降幅度较少,B组G+球菌占肠道总菌群数比率明显增加.B组肠道球菌数、杆球菌比值、G+杆菌/G+球菌占总细菌群数比率均高于C、D组,差异有显著性;与B组相比,A组肠道杆菌、G+杆菌数明显增加,G+球菌数及其占总细菌群数比率明显降低,差异均有显著性.结论 添加双歧杆菌可以降低由人工喂养、缺氧冷刺激所引起的新生大鼠肠损伤程度,具有抗NEC的保护作用.
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