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目的研究微小RNA21(miR21)在人牙周韧带细胞(PDLC)成骨分化早期的表达变化,探讨其对PDLC成骨分化的作用及可能的调控机制。方法培养PDLC,免疫细胞化学染色鉴定其来源。取第3~4代细胞矿化培养7、14、21 d进行碱性磷酸酶(ALP)检测,21 d进行茜素红染色;分别培养4 h和1、3、7 d,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR21、靶基因萌牙2(SPRY2)和Runt相关转录因子2(RUNX2);Western blot检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、磷酸化p38、SPRY2和RUNX2。对照组为正常培养细胞。结果培养的PDLC来源于间充质,7、14、21 d的ALP活性明显增高(t7 d=2.707,P7 d=0.011;t14 d=8.189,P14 d=0.001;t21 d=3.546,P21 d=0.024),矿化诱导21 d茜素红染色可见矿化结节,具有成骨分化能力;实时荧光定量PCR结果显示,miR21在矿化诱导3、7 d表达上升,SPRY2的表达则呈下降趋势(FmiR21=14.567,PmiR21<0.05,FSPRY2=7.765,PSPRY2=0.004);Western blot结果显示,ERK-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在矿化诱导第1天始激活,而后稳步上升(t1 d=14.378,P3 d<0.05,t3 d=6.558,P3 d=0.003,t7 d=10.685,P7 d<0.05);p38 MAPK信号通路活性在诱导4 h时被激活,而后与对照组活性无差异,在第7天时有所升高(t4 h=18.803,P4 h<0.05,t7 d=9.643,P7 d=0.001)。结论 miR21与PDLC成骨分化相关,其调控机制可能与ERK-MAPK、p38 MAPK信号通路相关;miR21可能靶向SPRY2调控ERK-MAPK信号通路活性,实验结果为进一步研究miR21的功能作用与调控机制提供理论依据。