【摘 要】
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白血病抑制因子(LIF)为一种多功能细胞因子,在生物发育及维持正常生理功能中发挥着重要的作用.LIF在所有的哺乳动物中都具有高度的保守性,某些氨基酸在不同物种中保持不变.LI
【机 构】
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清华大学生物科学与技术系,北京,100084清华大学生命科学与医学研究院,北京,100084;清华大学生物科学与技术系,北京,100084;北京大学第三医院,北京,100083;
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白血病抑制因子(LIF)为一种多功能细胞因子,在生物发育及维持正常生理功能中发挥着重要的作用.LIF在所有的哺乳动物中都具有高度的保守性,某些氨基酸在不同物种中保持不变.LIF中29位氨基酸在所有的哺乳动物中都是Q为了研究Q对LIF功能的重要性,利用随机PCR的方法将29位氨基酸突变为R,并将突变后的LIF克隆到真核表达载体pcDNA6,在哺乳动物细胞中成功表达.同时以克隆到的野生型LIF作为对照.将分泌到细胞培养基中的野生型和突变LIF因子收集,通过EMSA实验以及荧光素酶报告系统检测,发现野生型LIF因子具有激活STAT3信号通路的生物学活性.同时,3H-TdR掺入实验结果表明,野生型LIF因子能显著抑制鼠骨髓白血病细胞系M1的增殖.而29位氨基酸突变的LIF因子则完全丧失了以上功能,但所发现的突变没有显性负的作用.结果充分说明,LIF中高度保守的29位氨基酸对LIF功能的维持具有重要的作用.
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