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目的 探讨5-氮杂胞苷(5-aza)诱导心脏成纤维细胞(CFs)向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异.方法 新生1～3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2(DDR2)并行细胞免疫荧光染色.含15 μmol/L 5-aza心肌细胞诱导液培养第3代CFs,Real-time PCR 检测心肌化诱导不同时间点相关基因vimentin、DDR2、Nanog、sox2、c-kit、sca-l、Tbx5、CD73、CD34、cMyc、klf4、Gata4、0ct4、Mef2c和心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达差异,细胞免疫荧光检测心肌化诱导后5 d、7 d、14 d、21 d和28 d肌钙蛋白T(cTnT)的表达.透射电子显微镜观察心肌化诱导28 d CFs的超微结构变化.结果 5-aza诱导CFs后3d细胞生长速率减慢,部分细胞由三角形、梭形向圆形和杆状转变.诱导后7 d、14 d、21 d和28 d,与诱导前相比,DDR2表达稳定,vimentin在14 d表达下降,Nanog、c-kit、sox2和Tbx5伴随着心肌化进程呈现表达下降趋势,而CD73、Mef2c、CD34、Gata4、0ct4和cTnT表达逐步增加,sca-1在7d表达上升又下降,cMyc和klf4在14 d表达上升又下降.诱导后5d少量细胞表达cTnT,14～21 d cTnT阳性细胞数明显增高,28 d表达cTnT较多且趋于稳定.透射电子显微镜显示,CFs心肌化诱导28 d,细胞与细胞间出现端-端连接,细胞质内出现大量的肌原纤维,排列较为规律,但肌节不明显,H带、Z线和M线显示不清.结论 CFs经5-aza诱导,可向心肌样细胞分化,但不能形成成熟的心肌细胞.