斑点叉尾鮰病毒“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达检测

来源 :水生态学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mynewgolvoe

【摘要】

：

根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到＂自杀性＂DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1（＋）中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰（Icta

【作者】

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熊海林尹殿卯王卫民王敏李莉娟刘玉林刘学芹吴兵

【机构】

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华中农业大学水产学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室

【出处】

：

水生态学杂志

【发表日期】

：

2011年1期

【关键词】

：

斑点叉尾鮰病毒 “自杀性”DNA疫苗构建表达 CCV suicide DNA vaccine construction expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30901118）, 教育部新教师基金（20070504047）, 湖北省自然科学基金（2008CBB099）, 华中农业大学教师启动基金（2006XRC047）

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根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到＂自杀性＂DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1（＋）中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰（Ictalurus punc-tatus）＂自杀性＂DNA疫苗ps-ORF6与常规DNA疫苗pcd-ORF6,利用转化后的大肠杆菌菌液为模板进行PCR扩增、提取质粒酶切鉴定以及序列测定等方法证实重组质粒构建正确。将重组质粒转染人胚肾细胞（293T）,间接免疫荧光试验表明ORF6均获得表达,但＂自杀性＂D

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