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利用豌豆根瘤菌（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ）ＤＮＡ和好气性固氮菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）ＤＮＡ之间的同源性，将ｎｉｆＤ基因插入了Ｔｎ５的豌豆根瘤菌突变株来诱导在ｎｉｆＤ基因上产生变异的Ａ．ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ突变株．先将豌豆根瘤菌的固氮结构基因ｎｉｆＤＨ克隆到大肠杆菌质粒ＰＲＫ２９０形成新的质粒ＰＲＫ２５０９，在协助质料ＰＲＫ２０１３的帮助下转入Ａ．ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ．对于筛选出的失去固氮能力的Ａ．ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ突变株进行测定，检测无细胞提取物中不同固氮酶组