评价小窝蛋白-1(Cav-1)在盐酸戊乙奎醚抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞Toll样受体4/p38丝裂原活化蛋白激酶(TLR4/p38 MAPK)信号通路激活中的作用。
方法将小鼠巨噬细胞接种于6 cm培养皿(5 ml/个)中，采用随机数字表法分为5组(n＝20)：Scr-siRNA对照组(S组)、Scr-siRNA ＋ LPS组(LPS组)、Scr-siRNA＋LPS＋盐酸戊乙奎醚组 (LPS＋P组)、Cav-1-siRNA＋LPS组 (C＋LPS组)和Cav-1-siRNA＋LPS＋盐酸戊乙奎醚组 (C＋LPS＋P组)。S组、LPS组和LPS＋P组经Scr-siRNA转染24 h，C＋LPS组和C＋LPS＋P组经Smart pool Cav-1 siRNAs转染24 h；转染结束后LPS组、LPS＋P组、C＋LPS和C＋LPS＋P组加入终浓度为1 μg/ml的LPS孵育2 h；LPS＋P组和C＋LPS＋P组于LPS孵育2 h后加入终浓度为2 μg/ml的盐酸戊乙奎醚孵育2 h。采用Western blot法检测Cav-1和TLR4的表达水平，采用免疫荧光法检测p38 MAPK表达水平，采用ELISA法检测培养液TNF-α浓度，采用比色法检测髓过氧化物酶(MPO)活性。
结果与S组比较，其余4组TLR4和p38 MAPK表达上调，培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性升高，LPS组和C＋LPS组Cav-1表达下调(P < 0.05)，LPS＋P组Cav-1表达差异无统计学意义(P>0.05)；与LPS组比较，LPS＋P组Cav-1表达上调，TLR4和p38 MAPK表达下调，培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性降低，C＋LPS组Cav-1表达下调，TLR4和p38 MAPK表达上调，培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性升高(P<0.05)；与LPS＋P组比较，C＋LPS＋P组Cav-1表达下调，TLR4和p38 MAPK表达上调，培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性升高(P<0.05)；与C＋LPS组比较，C＋LPS＋P组Cav-1表达上调，TLR4和p38 MAPK表达下调，培养液TNF-α浓度和细胞MPO活性降低 (P < 0.05)。
结论盐酸戊乙奎醚抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞TLR4/p38 MAPK信号通路激活的机制与上调Cav-1表达有关。