【摘 要】
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[目的]分离丽江猪丝裂原活化蛋白激酶10?(mitogen-activated?protein?kinase,MAPK10)?基因序列,并分析其组织mRNA和蛋白表达情况.[方法]采用PCR技术扩增丽江猪MAPK10基因,并利用生物信息学软件对获得的序列进行分析,实时荧光定量PCR检测丽江猪脑、肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、背脂和背最长肌等9种组织中MAPK10基因的相对表达量;以大白猪为对照,实时荧光定量PCR和Western-blot-ting检测丽江猪与大白猪背脂中mRNA和蛋白表达差异.[结
【机 构】
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云南农业大学 动物科学技术学院,云南 昆明 650201;云南省宣威市畜禽改良工作站,云南 宣威 655400
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[目的]分离丽江猪丝裂原活化蛋白激酶10?(mitogen-activated?protein?kinase,MAPK10)?基因序列,并分析其组织mRNA和蛋白表达情况.[方法]采用PCR技术扩增丽江猪MAPK10基因,并利用生物信息学软件对获得的序列进行分析,实时荧光定量PCR检测丽江猪脑、肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、背脂和背最长肌等9种组织中MAPK10基因的相对表达量;以大白猪为对照,实时荧光定量PCR和Western-blot-ting检测丽江猪与大白猪背脂中mRNA和蛋白表达差异.[结果]MAPK10基因序列总长1281?bp,编码426个氨基酸;MAPK10蛋白属亲水蛋白,无跨膜结构和信号肽,有44个磷酸化位点和2个糖基化位点;二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主;丽江猪MAPK10基因序列与人、牛、山羊、绵羊、鼠、狗、猴和鸡的同源性分别为95.3％、93.5％、93.2％、93.0％、92.6％、91.2％、90.5％和85.6％;MAPK10基因在丽江猪9个组织中差异表达,以脑中最高;丽江猪背脂MAPK10基因的mRNA表达量极显著低于大白猪?(P0.05).[结论]MAPK10基因可作为研究丽江猪脂肪沉积性状的候选基因,结果可为研究猪脂肪沉积提供参考.
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