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目的
探讨小鼠肾脏缺血再灌注时肾组织角蛋白家族基因表达的变化。
方法野生型雄性C57/B6小鼠6只,50日龄,体重20~30 g,采用随机数字表法分为2组(n=3):假手术组(Sham组)和缺血再灌注组(I/R组)。采用夹闭右侧肾动脉与肾静脉1 h后再恢复灌注,并切除左侧肾脏的方法建立小鼠肾脏缺血再灌注模型。再灌注24 h时经左心室采血,比色法检测血清肌酐及尿素氮浓度;取右侧肾组织,HE染色法观察病理学结果;采用qRT-PCR检测肾组织Kim-1、Ngal的mRNA表达水平;采用基因表达谱芯片分析技术检测肾组织角蛋白家族基因的表达水平,筛选出的差异基因进一步通过qRT-PCR验证。
结果与Sham组相比,I/R组血清肌酐和尿素氮浓度明升高,肾组织Kim-1、Ngal的mRNA表达上调(P<0.05),肾小管病理学损伤加重。基因表达谱芯片检测结果显示角蛋白家族基因中仅角蛋白20基因(表达上调)为差异表达基因(P<0.05),qRT-PCR验证检测结果与基因表达谱芯片检测结果一致。
结论小鼠肾脏缺血再灌注损伤时肾组织角蛋白20基因表达上调,该变化可能参与了肾脏缺血再灌注损伤时的内源性保护机制。