人源性防御素HD-5的原核表达及抗真菌作用的初步研究

来源 :天津医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xulee_jj

【摘要】

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目的：构建pQE-30Xa/HD-5原核表达载体，纯化重组蛋白并进行抗真菌活性的初步鉴定。方法以pcDNA3.1（＋）/HD-5为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增编码HD-5成熟肽的基因。构建pQE-30Xa/HD-5重组

【作者】

：

张萍萍尹利荣王芳孙蓓霍彦

【机构】

：

天津医科大学第二医院妇科,天津医科大学内分泌研究所,天津医科大学第二医院计划生育科

【出处】

：

天津医药

【发表日期】

：

2014年8期

【关键词】

：

防御素类重组融合蛋白质类大肠杆菌防御素-5 原核表达亲和层析抗真菌活性 defensins recombinant fusion proteins E

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目的：构建pQE-30Xa/HD-5原核表达载体，纯化重组蛋白并进行抗真菌活性的初步鉴定。方法以pcDNA3.1（＋）/HD-5为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增编码HD-5成熟肽的基因。构建pQE-30Xa/HD-5重组表达载体，并对重组质粒进行酶切、基因序列分析。将鉴定正确的质粒转化入大肠杆菌M15后进行异丙基-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，对表达产物进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定。通过镍柱亲和层析纯化蛋白并进行蛋白复性，蛋白免疫印迹（Western blot）鉴

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