稳定表达绵羊肺腺瘤病毒受体Hyal-2蛋白细胞系的建立

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liuqingq

【摘要】

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为构建稳定表达绵羊肺腺瘤病毒（JSRV）受体透明质酸酶-2（Hyal-2）的NIH 3T3细胞系，本研究采用RT-PCR方法从绵羊瘤胃组织总RNA中扩增Hyal-2的cDNA，并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶

【作者】

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刘畅李磊于立新么宏强周建华马学恩

【机构】

：

内蒙古农业大学兽医学院,农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2014年3期

【关键词】

：

绵羊肺腺瘤病毒透明质酸酶-2 真核表达 NIH 3T3细胞系 Jaagsiekte retrovirus hyaluronoglucosaminidase

【基金项目】

：

国家自然科学基金（31060332）

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为构建稳定表达绵羊肺腺瘤病毒（JSRV）受体透明质酸酶-2（Hyal-2）的NIH 3T3细胞系，本研究采用RT-PCR方法从绵羊瘤胃组织总RNA中扩增Hyal-2的cDNA，并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点，将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1（＋）中，构建重组质粒pcDNA-Hyal2-HA。将该重组质粒转染NIH 3T3细胞，并利用G418筛选、纯化，获得了稳定表达JSRV受体蛋白Hyal-2的NIH 3T3细胞系。qPCR、间接免疫荧光及western blot检测结果表明，该细胞系在传

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