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摘 要 为了解云南省楚雄州牟定县江坡镇盐梅花而不实的原因，在初花期对不同着果情况的盐梅树进行取样，观察花器官形态并统计完全花和不完全花的比例，同时采用TTC染色法测定花粉生活力。结果表明，着果多的盐梅树不完全花比例为22.6%，着果极少的不完全花比例在70%左右;不完全花多表现为花柱萎缩。不同着果情况的盐梅有生活力花粉均在50%以上，最高达81.9%;推测导致盐梅花而不实的主要原因是花器官发育不良，尤其是雌蕊退化。
关键词 果梅;花而不实;花粉活力;雌蕊退化;云南省楚雄州牟定县江坡镇
中图分类号：S573.9 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.18.002
云南省拥有丰富的果梅种质资源，分布范围广。云南果梅产业自1980年代开始形成，之后得到了较大发展，2006年云南已成为我国果梅主产区之一[1]。在云南，果梅的主要产区和加工地在大理州。2013年文獻数据显示，云南果梅鲜果产量已居全国首位。果梅已经成为云南省西北高寒山区居民重要的经济来源果树之一[2]。但果梅生产中，也存在着一些突出问题：比如果梅基地多分布在山区、半山区，且果园较为零星、分散，推广实用栽培技术难度大;重生产轻管理，部分果农栽培管理较为粗放，挂果投产率和平均产量低等[3]。这些问题如不能改善，将严重限制果梅产业的进一步发展。云南省楚雄州牟定县江坡镇果梅栽培已有近20年历史，主要种植果梅品种有盐梅、照水梅等，引自大理州，生产上盐梅大小年和花而不实一直困扰着种植户。因此，通过观察盐梅花器官形态及测定花粉活力，对盐梅花而不实的原因进行初步探索，以期为生产上提高盐梅产量提供借鉴。
1 试验材料与方法
1.1 试验材料
取样地点位于楚雄州牟定县江坡镇果梅园，该园处于山坡地。盐梅树为半台地种植，管理较为粗放，大多数花而不实。在初花期，于2020年1月19日在园内选取树势相当、开花情况相似、花朵均为白色单瓣花，但往年着果情况各异的5棵树进行取样。试验分3组：着果多（1号）;着果偏少（2、3号）;着果极少（4、5号）。
1.2 果梅花器官形态观察
每棵树选取含苞待放花蕾共30～50朵，带回实验室观察花器官形态。按花器官形态，将花分为完全花和不完全花，并统计不完全花比例。不完全花包括空心花及花柱萎缩[4]。
1.3 果梅花粉活力测定
花粉活力测定用TTC染色法。按邹琦的实验方法，有所改动。称取0.7 g TTC，用少量95%乙醇溶解，后用蒸馏水定容至100 mL。为增加染色效果，将pH值调至6～8。混合后的花药置于载玻片上，用挤压法分离花粉，滴1滴TTC试剂进行染色。置于35 ℃恒温箱中培养
20 min，然后于显微镜下观察花粉染色情况。染成红色代表花粉生活力强，粉色次之，不染色为无生活力花粉或不育花粉。每个样品制作3个制片，每个制片观察5个镜头，统计花粉的染色率，以染色率表示花粉的活力百分率。
2 结果与分析
2.1 盐梅花器官形态观察
从表1中可以看到，对不同着果情况盐梅不完全花进行统计，发现着果多的1号不完全花比例最低，为22.6%;着果偏少的2号和3号不完全花比例分别为24.1%和37.0%;而着果极少的4号和5号的不完全花比例都较高，分别达65.8%和74.1%。通过观察发现，不完全花类型主要为花柱萎缩。
2.2 盐梅花粉活力测定
图1中显示了不同着果情况盐梅花粉染色结果，可以看到大多数花粉均可染色。从表2中的统计结果可以看到，着果多的1号有活力花粉百分率为67%，着果偏少的2号和3号分别为57.3%和81.9%，着果极少的4号和5号有活力花粉百分率也较高，分别达72.9%和75.4%。
综上分析，不同着果情况盐梅树有活力花粉百分率均达到50%以上，即使本身有活力花粉百分率较低，但多数盐梅有活力花粉百分率均较高。同时果园内有大量蜜蜂传粉，因此导致盐梅花而不实的原因可能不是花粉活力问题。从表1中也可以看到，着果极少的盐梅树不完全花比例均较高，最高达74.1%，进一步说明盐梅花而不实可能是由于花器官发育不良引起的。
3 结论与讨论
花粉的育性可通过测定花粉活力来进行评价。花粉活力的测定方法可分为染色法和离体萌发法。染色法操作快速简便，但受花粉自身特性的影响较大，不能直接表现花粉的萌发率。离体萌发测定法可以直观区分死亡或缺乏活力的花粉，数据可靠，但需要依据不同种类配制不同的培养基。邓彪等比较了不同染色法和离体萌发法检测香蕉花粉活力的效果，结果发现TTC与MTT染色法处理后花粉形态较清晰，容易区分染色与未染色的花粉。进一步相关性分析表明，TTC染色法MTT染色法与萌发法的线性相关系数分别为0.91和0.96。因此，用TTC染色法在一定程度上可反映花粉育性。
果梅花雌蕊退化现象严重，退化花的类型有：雌蕊完全退化呈空心花，子房小花柱细短和花柱弯曲等。退化花的多少主要因品种特性而异，同时和果枝类型，开花早晚及树体营养有密切关系。侍婷等通过对47个不同的中外果梅品种的不完全花比例进行调查，发现在所调查的品种中，不完全花比例一般占总花量的1.17～59.65%。在另一个研究中，比较不同时期果梅品种“龙眼”和“大嵌蒂”不完全花比例，发现盛花期“龙眼”不完全花比例仅为5.0%，而“大嵌蒂”不完全花比例高达76.3%。除了品种的原因，树体营养和外界气候因子都可以影响果树的雌蕊发育。张玲等观测了施肥对大扁杏雌蕊发育状况的影响，结果表明，秋季土壤施肥可以提高大扁杏完全花的比例，且主要是增加短果枝、花束状果枝上完全花的数量。戴桂林等认为杏雌蕊败育是华北生态品种群中普遍存在的问题，是杏树“花而不实”的主要原因。对杏雌蕊败育与主要气象因子关系的研究表明，杏雌蕊败育率与上年8月的降水量及休眠期低于
7.2 ℃的时数呈显著的负相关。
杏李和其他许多蔷薇科果树存在着花量大、花而不实及自交不亲和等现象。果树授粉后不结实的主要原因有3个：1）花粉败育;2）雌蕊败育;3）授粉不亲和[4]。梅是蔷薇科李属典型的配子体自交不亲和树种[5]。本试验中3号和4号盐梅树不完全花比例较低，但着果偏少，可能与授粉不亲和，授粉时期的温度、湿度等有关，因此还有待进一步研究。
本试验通过对不同着果情况的盐梅进行花器官形态观察与花粉活力测定，初步推测盐梅花而不实的主要原因是花器官发育不良，尤其是雌蕊退化。进一步分析造成雌蕊退化的原因，提出了以下3点建议措施。1）针对品种自身的原因，选择连年丰产的优良单株作为母株，采其枝条进行高接换种;2）对于可能存在的授粉不亲和问题，后期可通过进一步鉴定品种，并结合生产实践经验合理配置授粉树组合;3）加强水肥管理，尤其是在花果发育的关键时期，应做到：秋施基肥，保证树体营养，促进花芽正常发育;冬季始花期施氮、钾为主的速效肥，并进行灌水;盛花时期喷施尿素、磷酸二氢钾和硼酸的混合营养液进行保花，同时可加强授粉效果;果实膨大期适当追肥，以尿素或硫酸铵等无机肥为主。
参考文献：
[1] 胡忠荣，陈伟，李坤明.云南的果梅资源及研究利用概况[C].全国野生果树资源研究与开发利用学术研讨会.2006.
[2] 李协鼎，华珊.大理洱宝的梅果产业发展[J].北京林业大学学报，2013，35（S1）：18-20.
[3] 杨凤刚，杨海丽，杨帜辉，等.大理州特色水果产业现状及发展对策[J].中国果业信息，2015，32（5）：13-17.
[4] 魏雅君，徐业勇，冯贝贝，等.杏李品种授粉亲和性研究[J].果树学报，2017，34（2）：204-214.
[5] 高志红，侍婷，倪照君，等.梅种质资源与分子生物学研究进展[J].南京农业大学学报，2019，42（6）：975-985.
（责任编辑：赵中正）
关键词 果梅;花而不实;花粉活力;雌蕊退化;云南省楚雄州牟定县江坡镇
中图分类号：S573.9 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.18.002
云南省拥有丰富的果梅种质资源，分布范围广。云南果梅产业自1980年代开始形成，之后得到了较大发展，2006年云南已成为我国果梅主产区之一[1]。在云南，果梅的主要产区和加工地在大理州。2013年文獻数据显示，云南果梅鲜果产量已居全国首位。果梅已经成为云南省西北高寒山区居民重要的经济来源果树之一[2]。但果梅生产中，也存在着一些突出问题：比如果梅基地多分布在山区、半山区，且果园较为零星、分散，推广实用栽培技术难度大;重生产轻管理，部分果农栽培管理较为粗放，挂果投产率和平均产量低等[3]。这些问题如不能改善，将严重限制果梅产业的进一步发展。云南省楚雄州牟定县江坡镇果梅栽培已有近20年历史，主要种植果梅品种有盐梅、照水梅等，引自大理州，生产上盐梅大小年和花而不实一直困扰着种植户。因此，通过观察盐梅花器官形态及测定花粉活力，对盐梅花而不实的原因进行初步探索，以期为生产上提高盐梅产量提供借鉴。
1 试验材料与方法
1.1 试验材料
取样地点位于楚雄州牟定县江坡镇果梅园，该园处于山坡地。盐梅树为半台地种植，管理较为粗放，大多数花而不实。在初花期，于2020年1月19日在园内选取树势相当、开花情况相似、花朵均为白色单瓣花，但往年着果情况各异的5棵树进行取样。试验分3组：着果多（1号）;着果偏少（2、3号）;着果极少（4、5号）。
1.2 果梅花器官形态观察
每棵树选取含苞待放花蕾共30～50朵，带回实验室观察花器官形态。按花器官形态，将花分为完全花和不完全花，并统计不完全花比例。不完全花包括空心花及花柱萎缩[4]。
1.3 果梅花粉活力测定
花粉活力测定用TTC染色法。按邹琦的实验方法，有所改动。称取0.7 g TTC，用少量95%乙醇溶解，后用蒸馏水定容至100 mL。为增加染色效果，将pH值调至6～8。混合后的花药置于载玻片上，用挤压法分离花粉，滴1滴TTC试剂进行染色。置于35 ℃恒温箱中培养
20 min，然后于显微镜下观察花粉染色情况。染成红色代表花粉生活力强，粉色次之，不染色为无生活力花粉或不育花粉。每个样品制作3个制片，每个制片观察5个镜头，统计花粉的染色率，以染色率表示花粉的活力百分率。
2 结果与分析
2.1 盐梅花器官形态观察
从表1中可以看到，对不同着果情况盐梅不完全花进行统计，发现着果多的1号不完全花比例最低，为22.6%;着果偏少的2号和3号不完全花比例分别为24.1%和37.0%;而着果极少的4号和5号的不完全花比例都较高，分别达65.8%和74.1%。通过观察发现，不完全花类型主要为花柱萎缩。
2.2 盐梅花粉活力测定
图1中显示了不同着果情况盐梅花粉染色结果，可以看到大多数花粉均可染色。从表2中的统计结果可以看到，着果多的1号有活力花粉百分率为67%，着果偏少的2号和3号分别为57.3%和81.9%，着果极少的4号和5号有活力花粉百分率也较高，分别达72.9%和75.4%。
综上分析，不同着果情况盐梅树有活力花粉百分率均达到50%以上，即使本身有活力花粉百分率较低，但多数盐梅有活力花粉百分率均较高。同时果园内有大量蜜蜂传粉，因此导致盐梅花而不实的原因可能不是花粉活力问题。从表1中也可以看到，着果极少的盐梅树不完全花比例均较高，最高达74.1%，进一步说明盐梅花而不实可能是由于花器官发育不良引起的。
3 结论与讨论
花粉的育性可通过测定花粉活力来进行评价。花粉活力的测定方法可分为染色法和离体萌发法。染色法操作快速简便，但受花粉自身特性的影响较大，不能直接表现花粉的萌发率。离体萌发测定法可以直观区分死亡或缺乏活力的花粉，数据可靠，但需要依据不同种类配制不同的培养基。邓彪等比较了不同染色法和离体萌发法检测香蕉花粉活力的效果，结果发现TTC与MTT染色法处理后花粉形态较清晰，容易区分染色与未染色的花粉。进一步相关性分析表明，TTC染色法MTT染色法与萌发法的线性相关系数分别为0.91和0.96。因此，用TTC染色法在一定程度上可反映花粉育性。
果梅花雌蕊退化现象严重，退化花的类型有：雌蕊完全退化呈空心花，子房小花柱细短和花柱弯曲等。退化花的多少主要因品种特性而异，同时和果枝类型，开花早晚及树体营养有密切关系。侍婷等通过对47个不同的中外果梅品种的不完全花比例进行调查，发现在所调查的品种中，不完全花比例一般占总花量的1.17～59.65%。在另一个研究中，比较不同时期果梅品种“龙眼”和“大嵌蒂”不完全花比例，发现盛花期“龙眼”不完全花比例仅为5.0%，而“大嵌蒂”不完全花比例高达76.3%。除了品种的原因，树体营养和外界气候因子都可以影响果树的雌蕊发育。张玲等观测了施肥对大扁杏雌蕊发育状况的影响，结果表明，秋季土壤施肥可以提高大扁杏完全花的比例，且主要是增加短果枝、花束状果枝上完全花的数量。戴桂林等认为杏雌蕊败育是华北生态品种群中普遍存在的问题，是杏树“花而不实”的主要原因。对杏雌蕊败育与主要气象因子关系的研究表明，杏雌蕊败育率与上年8月的降水量及休眠期低于
7.2 ℃的时数呈显著的负相关。
杏李和其他许多蔷薇科果树存在着花量大、花而不实及自交不亲和等现象。果树授粉后不结实的主要原因有3个：1）花粉败育;2）雌蕊败育;3）授粉不亲和[4]。梅是蔷薇科李属典型的配子体自交不亲和树种[5]。本试验中3号和4号盐梅树不完全花比例较低，但着果偏少，可能与授粉不亲和，授粉时期的温度、湿度等有关，因此还有待进一步研究。
本试验通过对不同着果情况的盐梅进行花器官形态观察与花粉活力测定，初步推测盐梅花而不实的主要原因是花器官发育不良，尤其是雌蕊退化。进一步分析造成雌蕊退化的原因，提出了以下3点建议措施。1）针对品种自身的原因，选择连年丰产的优良单株作为母株，采其枝条进行高接换种;2）对于可能存在的授粉不亲和问题，后期可通过进一步鉴定品种，并结合生产实践经验合理配置授粉树组合;3）加强水肥管理，尤其是在花果发育的关键时期，应做到：秋施基肥，保证树体营养，促进花芽正常发育;冬季始花期施氮、钾为主的速效肥，并进行灌水;盛花时期喷施尿素、磷酸二氢钾和硼酸的混合营养液进行保花，同时可加强授粉效果;果实膨大期适当追肥，以尿素或硫酸铵等无机肥为主。
参考文献：
[1] 胡忠荣，陈伟，李坤明.云南的果梅资源及研究利用概况[C].全国野生果树资源研究与开发利用学术研讨会.2006.
[2] 李协鼎，华珊.大理洱宝的梅果产业发展[J].北京林业大学学报，2013，35（S1）：18-20.
[3] 杨凤刚，杨海丽，杨帜辉，等.大理州特色水果产业现状及发展对策[J].中国果业信息，2015，32（5）：13-17.
[4] 魏雅君，徐业勇，冯贝贝，等.杏李品种授粉亲和性研究[J].果树学报，2017，34（2）：204-214.
[5] 高志红，侍婷，倪照君，等.梅种质资源与分子生物学研究进展[J].南京农业大学学报，2019，42（6）：975-985.
（责任编辑：赵中正）