【摘 要】
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目的克隆肝癌中CK2α基因,并研究其功能.方法通过逆转录PCR从肝癌组织中获得CK2α亚基基因编码区cDNA.将NdeI/BamHI 双酶切PCR产物连接到同样双酶切并经牛小肠碱性磷酸酶去磷
【机 构】
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南京师范大学生命科学院,江苏省启东肝癌研究所
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目的克隆肝癌中CK2α基因,并研究其功能.方法通过逆转录PCR从肝癌组织中获得CK2α亚基基因编码区cDNA.将NdeI/BamHI 双酶切PCR产物连接到同样双酶切并经牛小肠碱性磷酸酶去磷酸化的表达载体pT7-7 进行定向克隆.转化感受态大肠杆菌DH5 获得转化子,琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化子,将阳性克隆进行单和双酶切分析鉴定.随机挑选4个阳性克隆进行DNA测序,将序列完全正确的重组质粒转化表达菌BL21(DE3),挑单克隆小量培养,IPTG诱导表达,Western blot 鉴定.结果转化子的阳性筛选
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