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以狗头枣ACO I基因外显子Ⅲ和Ⅳ的部分序列为靶标序列,采用一步PCR法对其进行融合扩增.经与t载体连接、测序.结果表明：经一步PCR法扩增到大小为589bP的融合基因片段,经序列比对,其与ACO I外显子Ⅲ和Ⅳ序列一致性为100%.表明在一个PCR反应体系中通过4引物一次性扩增可获得融合基因,该方法是一种简便、经济、有效的融合基因构建方法.