【摘 要】
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目的 探讨miRNA-21对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)特性的影响.方法 BMSCs使用DMEM液进行培养传代,流式细胞仪检测BMSCs的表面相关抗原表
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院心血管外科 上海200127
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目的 探讨miRNA-21对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)特性的影响.方法 BMSCs使用DMEM液进行培养传代,流式细胞仪检测BMSCs的表面相关抗原表达.建立miRNA-21慢病毒干扰载体(LV-miRNA-21),并转染BMSCs.分3组细胞进行对比实验[CK(正常组)、NC(对照组)、miRNA-21组],分别培养3d、7d和14d;利用免疫荧光染色技术和Western-blotting技术检测并比较肌钙蛋白在3组细胞中3个时间点的表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测3组BMSCs的增殖情况,运用流式细胞技术检测3组BMSCs的细胞周期及凋亡情况.结果 BMSCs呈长梭形不规则形态,表现出干细胞特异性抗原CD90和CD29阳性,CD45阴性.成功构建LV-miRNA-21;发现在miRNA-21组BMSCs中经诱导分化后肌钙蛋白表达量明显高于CK组和NC组(P＜0.05),在miRNA-21组中表现出细胞的增殖加快,但凋亡速度比CK组和NC组减慢.结论 miRNA-21影响BMSCs的增殖和凋亡,可能对干细胞分化发挥着重要作用.
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