兔白细胞介素-10基因的克隆、原核表达及其多克隆抗体的制备

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cj1314810814

【摘要】

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白细胞介素-10（IL-10）是一种多功能的细胞因子,参与免疫调节和抗炎反应。本研究旨在克隆并表达IL-10基因,以制备兔IL-10多克隆抗体。运用RT-PCR技术从新西兰白兔脾脏总RNA中扩

【作者】

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万小颖秦立志施丽娟王文洲李挺李碧春吴信生

【机构】

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扬州大学动物科学与技术学院,江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室

【出处】

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畜牧兽医学报

【发表日期】

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2013年5期

【关键词】

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白细胞介素-10基因克隆表达抗体制备 IL-IO gene cloning expression antibody preparation

【基金项目】

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现代农业产业技术体系建设专项资金资助（CARS-44-1）,江苏高校优势学科建设工程资助项目（苏政办发[2011]137号）,江苏省研究生科研创新计划（CXLXll_1027）

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白细胞介素-10（IL-10）是一种多功能的细胞因子,参与免疫调节和抗炎反应。本研究旨在克隆并表达IL-10基因,以制备兔IL-10多克隆抗体。运用RT-PCR技术从新西兰白兔脾脏总RNA中扩增IL-10基因,将该基因亚克隆入原核表达载体pET-32a并转入大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达获得融合蛋白,融合蛋白经纯化后免疫豚鼠制备多克隆抗体,最后分别用间接ELISA和Western blot检测抗体的效价和特异性。结果表明：克隆得到了兔IL-10基因,大小为537bp,经核苷酸测序与GenBank已登

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