【摘 要】
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根据2005年从北京某牛场分离得到的一株牛肠道病毒2型（BEV-2）毒株序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增BEV-2包含VP1（840 bp）蛋白基因片段的VP1＋（1 275 bp）序列,扩增产物克隆到p
【机 构】
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青岛农业大学动物科技学院,北京出入境检验检疫局
【基金项目】
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国家质检总局科研项目“牛肠道病毒2型抗体及抗原ELISA检测技术研究”（2013IK026）
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根据2005年从北京某牛场分离得到的一株牛肠道病毒2型（BEV-2）毒株序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增BEV-2包含VP1（840 bp）蛋白基因片段的VP1＋（1 275 bp）序列,扩增产物克隆到p MD-T19,进行测序验证。验证该序列为目的片段后,将其克隆到表达载体p ET-32a。重组质粒转化至Rosetta,经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示重组蛋白在大肠杆菌中高效表达。将重组蛋白作检测抗原包被酶标板,成功建立了检测牛肠道病毒2型抗体的间接ELISA方法。上述工作,为下一步
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